权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

幹細胞分化における基底膜蛋白質ラミニンの機能解析

基底膜蛋白层粘连蛋白在干细胞分化中的功能分析

基本信息

批准号：
18770089
负责人：
二木杉子
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18770089/
关键词：
細胞外マトリックス基底膜ラミニン ES細胞幹細胞

项目摘要

本研究は、基底膜蛋白質ラミニンがマウス胚性幹細胞(ES細胞)の分化に及ぼす影響を解析し、基底膜が細胞の分化制御にどのような役割を果たしているかを明らかにすることを目標としている。平成19年度は、組換え蛋白として発現・精製した各種ラミニンアイソフォームを細胞培養基質として用い、各アイソフォーム上におけるES細胞分化パターンの比較を行った。1)ES細胞は胚様体形成法によって分化誘導を行った後、細胞を解離して各種ラミニンまたは他の細胞外マトリックス蛋白質でコーティイングした上に播種した。ラミニン511、フィブロネクチンは比較的強い細胞接着活性を示したのに対し、ラミニン211、411、IV型コラーゲンでは細胞接着活性が低かった。2)各種細胞外マトリックス上で培養した細胞から継続的に全RNAを抽出し、分化マーカー遺伝子の発現パターンを定量RT-PCR法により解析した。その結果、中胚葉分化マーカー遺伝子であるBrachyury、Goosecoidの発現レベルが接着基質によって大きく影響を受けることが示唆された。3)一方、胚葉体での分化誘導は異なる細胞系譜が混在することから、特定の系譜への分化誘導効率の評価には至らなかった。また、細胞分化の方向性には胚葉体ごとに差異があり、分化誘導条件を均一にすることが難しいなどの分化誘導系の問題点も明らかとなった。今後、ES細胞分化におけるラミニンアイソフォームの影響を評価するためには、細胞表面マーカー分子の発現などを指標に特定の分化系譜にある細胞を単離し、それを用いて基質上での培養を行う方法が有効だと考えられる。本研究の結果から、分化誘導刺激をうけたES細胞は細胞外マトリックス基質によって異なる接着性を示し、分化マーカー遺伝子の発現パターンも異なることが示された。このことから、細胞外マトリックスによる選択的分化誘導制御の可能性が示唆された。

In this study, the basement membrane proteins (BMPs) were divided into embryogenic cells (ES cells), and the basement membrane (BM) cells were differentiated and analyzed. The basement membrane cells were differentiated to control the differentiation of the cells. In the year of Pingcheng in 1919, the results of the protein test showed that all kinds of equipment were used in cell culture, and the ES cell differentiation test was used in all kinds of equipment. 1) after the ES cell embryo formation method was conducted, the cells were dissociated from all kinds of cells, and the extracellular proteins were seeded on the computer. The activity of the strong cell of the predominant cell of the virus 511, the cell of the mouse, the cell of the cell, the activity of the cell, the activity of the cell and the activity of the cell. 2) the total RNA extraction and differentiation of all kinds of extracellular DNA were obtained. Quantitative RT-PCR analysis was performed. The results showed that the differentiation of mesoderm was complicated by Brachyury, and Goosecoid showed that there was a significant difference between the two groups. 3) one side, the embryo somatic differentiation leads the cell line to mix in the cell line, and the specific line is mixed with the cell line from one side to the other. The direction of cell differentiation, the difference of embryo body, the condition of differentiation and the condition of differentiation are all in the same order. In the future, ES cell differentiation, cell differentiation and cell differentiation. The results of this study were as follows: the results of this study showed that the ES cells were stimulated by differentiation, the extracellular cycle of the cells, the genes of the cells, the cells of the cells, and the cells of the cells. The possibility of differentiation and control of the election is indicated by the possibility of instigation and instigation.