転写因子PAX9を標的とした歯根膜幹細胞誘導因子の同定

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歯根膜組織中に存在する幹細胞は、歯周組織再生において重要な役割を果たすことが知られているが、それらは希少な細胞集団であるため、臨床への応用は困難である。そこで、当研究室では、iPS細胞に着目した。これまでに、申請者らはヒト歯根膜細胞（HPDLC）の細胞外基質（ECM）を用いることで、iPS細胞から分化誘導した神経堤細胞（iNC細胞）を歯根膜幹細胞様細胞（iPDLSC細胞）へと分化誘導することに成功した。しかしながら、HPDLCが産生するECMの複合体から、歯根膜幹細胞誘導因子（Factor-X）を同定することは困難である。そこで申請者らは、Factor-Xの産生を制御する転写因子に着目し、網羅的な遺伝子解析を行った。解析結果からHPDLCにて発現が高く、ヒト皮膚線維芽細胞（SF）にて発現が低い、Paired box gene 9（PAX9）を抽出した。本研究では、PAX9がiPDLSC細胞への分化誘導に及ぼす影響について解析し、その下流にあるFactor-Xを同定することを目的とした。今年度は再度PAX9の発現ベクターの作製を行い、iPDLSCへの分化誘導能を持たない不死化させた歯根膜細胞クローンにPAX9を過剰発現させた。この細胞上にてiNC細胞を２週間培養し、歯根膜特性について確認したが、歯根膜細胞マーカーの発現の上昇は認められなかった。ウエスタンブロッティングにてPAX9 の発現について確認を行ったが、1.5倍程度しか発現上昇が認められないことが原因と考えられる。今後の実験においては、PAX9の発現効率を上昇させる必要がある。