転写因子PAX9を標的とした歯根膜幹細胞誘導因子の同定

靶向转录因子PAX9的牙周膜干细胞诱导剂的鉴定

• 批准号: 21K09876
• 负责人: 濱野 さゆり
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09876/
• 关键词: iPS細胞; 歯根膜幹細胞; PAX9; iPDLSC細胞; 歯根膜幹細胞誘導因子

歯根膜組織中に存在する幹細胞は、歯周組織再生において重要な役割を果たすことが知られているが、それらは希少な細胞集団であるため、臨床への応用は困難である。そこで、当研究室では、iPS細胞に着目した。これまでに、申請者らはヒト歯根膜細胞（HPDLC）の細胞外基質（ECM）を用いることで、iPS細胞から分化誘導した神経堤細胞（iNC細胞）を歯根膜幹細胞様細胞（iPDLSC細胞）へと分化誘導することに成功した。しかしながら、HPDLCが産生するECMの複合体から、歯根膜幹細胞誘導因子（Factor-X）を同定することは困難である。そこで申請者らは、Factor-Xの産生を制御する転写因子に着目し、網羅的な遺伝子解析を行った。解析結果からHPDLCにて発現が高く、ヒト皮膚線維芽細胞（SF）にて発現が低い、Paired box gene 9（PAX9）を抽出した。本研究では、PAX9がiPDLSC細胞への分化誘導に及ぼす影響について解析し、その下流にあるFactor-Xを同定することを目的とした。今年度は再度PAX9の発現ベクターの作製を行い、iPDLSCへの分化誘導能を持たない不死化させた歯根膜細胞クローンにPAX9を過剰発現させた。この細胞上にてiNC細胞を２週間培養し、歯根膜特性について確認したが、歯根膜細胞マーカーの発現の上昇は認められなかった。ウエスタンブロッティングにてPAX9 の発現について確認を行ったが、1.5倍程度しか発現上昇が認められないことが原因と考えられる。今後の実験においては、PAX9の発現効率を上昇させる必要がある。

In the root membrane tissue, there are many cells in the root membrane tissue, and the tissue regeneration is very important in the root membrane tissue. When you are in the research room, you are in the iPS room, and you are watching. The root membrane cell (HPDLC), the extracellular base (ECM), the root membrane cell (iNC cell), the root membrane cell (iPDLSC cell), the root membrane cell, the iPDLSC cell. The genes of HPDLC, ECM, and Factor-X were identical to each other. Please contact the applicant and Factor-X students to make sure that the write factor is on the target, and the reader of the network resolves the profile. Analysis of the results showed that HPDLC cells showed high levels, SF cells showed low levels, and Paired box gene 9 (PAX9) cells were extracted. In this study, PAX9 iPDLSC cell differentiation guide and cell differentiation guide, obscene cell differentiation guide, dirty cell differentiation guide, dirty cell differentiation guide and Factor-X cell differentiation guide were used in this study. This year, PAX9 has been shown to be successful again, and the differentiation of iPDLSC has been shown to be successful in terms of immortalization, cell proliferation and PAX9. The iNC cell culture was carried out over two cycles, the root membrane properties were confirmed, and the root membrane properties were detected. Please tell me that the PAX9 is in order to make sure that the line is correct, and that the reason for this is not clear. From now on, you will need to know if it is necessary to make sure that there is an increase in the rate of increase in the rate of PAX9.

项目成果

Fibrillin-2がiPS細胞の歯根膜幹細胞様細胞への分化誘導に及ぼす影響について．

Fibrillin-2 对诱导 iPS 细胞分化为牙周膜干细胞样细胞的影响。

• 发表时间: 2022
• 作者: 濱野 さゆり;杉浦 梨紗;山下 大輝;友清 淳;杉井 英樹;吉田 晋一郎;糸山 知宏;前田 英史
• 通讯作者: 前田 英史

iPS細胞から歯根膜幹細胞様細胞への分化誘導能を有する候補因子の同定．

鉴定能够诱导 iPS 细胞分化为牙周膜干细胞样细胞的候选因子。

• 发表时间: 2022
• 作者: 杉浦梨紗;濱野さゆり;友清淳;長谷川大学;吉田晋一郎;杉井英樹;山下大輝;前田英史.
• 通讯作者: 前田英史.

フィーダーフリーにて培養可能なiPS細胞の歯根膜幹細胞様細胞分化の評価．

评估可无饲养层培养的 iPS 细胞的牙周膜干细胞样细胞分化。

• 发表时间: 2022
• 作者: 山下大輝;濱野さゆり;藤野翔香;杉浦梨沙;前田英史．
• 通讯作者: 前田英史．

Hyaluronic Acid Promotes the Differentiation of Human Neural Crest-like Cells into Periodontal Ligament Stem-like Cells

透明质酸促进人神经嵴样细胞分化为牙周膜干细胞

• 发表时间: 2022
• 作者: M Anas Alhasan;Atushi Tomokiyo;Taiga Ono ;Keita Ippoushi ;Kozue Yamashita ;Sayuri Hamano ;Daigaku Hasegawa;Hideki Sugii ;Hidefumi Maeda
• 通讯作者: Hidefumi Maeda