多色細胞系譜追跡法を用いた歯肉接合上皮の細胞供給システムの解明と幹細胞の同定

利用多色细胞谱系示踪法阐明牙龈交界上皮的细胞供应系统并鉴定干细胞

• 批准号: 21K09899
• 负责人: 山本 松男
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09899/
• 关键词: 接合上皮; 歯周組織; 幹細胞; クローン細胞集団; 歯周病; 多色細胞系譜の追跡

接合上皮は歯頸部で歯面に密着し異物の侵入を防ぐことで自然免疫の中心的な役割を果す。SPF飼育環境のマウスに比較して、通常環境で飼育した同種マウスの接合上皮では炎症反応が亢進し細胞分裂も盛んであることが示されている。組織恒常性維持のために盛んな細胞分裂が知られているが、それを維持する幹細胞の存在や細胞供給システムの解明には至っていない。これまでに多色細胞系譜追跡法により、1つの幹細胞に由来するクローン細胞集団の可視化にとりくんできた。タモキシフェンによりCre発現を制御できるレインボウ蛍光発色マウスを用いた解析系を確立し、発色後24週で接合上皮の基底層から歯肉溝までの全ての細胞が単色となる事を明らかにし、1つの幹細胞に由来するクローン細胞集団であることを確認した。本研究の目的は、クローン細胞集団内で幹細胞を頂点とする細胞ヒエラルキーの視点から階層性を解析することである。H30-R2年度科研費基C「多色細胞系譜追跡法を用いた歯肉接合上皮幹細胞の探索」（本人代表）で構築したRosa26CreERT2/+×Rosa26rbw/+マウス解析系を用い、接合上皮の前頭断面では外側基底板を底辺とし、エナメル質に沿って歯肉辺縁までの三角形の領域がクローン細胞集団の概形であことが明らかとなった。BrdUおよびEdUを用いた細胞分裂の盛んな領域の解析では基底層やエナメル質に接する層で細胞分裂が盛んであった。接合上皮幹細胞はWnt反応性の細胞であるとの報告がなされたので、Wnt下流遺伝子の1つであるβカテニンを検出することで追試を行ったところ、外側基底板のエナメル質から最も離れた端にある増殖細胞で、βカテニン陽性細胞の確認が出来た。

The joint epithelium is closely attached to the surface of the tooth to prevent the invasion of foreign bodies. Compared with the SPF breeding environment, the normal environment can show that the joint epithelium of the same kind of breeding environment has increased inflammation and cell division. Tissue homeostasis maintenance, cell division, and maintenance of stem cell existence, cell supply, and cell management This is a multi-color cell lineage tracing method for visualizing stem cell populations. The analysis system of Cre development was established, and the origin of Cre cell population was confirmed 24 weeks after development. The purpose of this study is to analyze the hierarchical structure of stem cells in a population of stem cells. H30-R2 Annual Research Fund C "Exploration of Conjunctive Epithelial Stem Cells Using Multicoloured Cell Genealogy Tracing Method"(my representative), Construction of Rosa26CreERT2/+×Rosa26rbw/+, Analysis System, Lateral Basal Plate, Triangular Domain of Conjunctive Epithelial Cell Set, Outline of Conjunctive Epithelial Cell Set The use of BrdU and EdU enables analysis of the dominant field of cell division, which is the layer between the basal layer and the extracellular matrix. Conjugated epithelial stem cells were identified as Wnt resistant cells, Wnt downstream cells, and β-cell positive cells.

项目成果

Junctional Epithelial Cells are Supplied by Putative Stem Cells

连接上皮细胞由假定的干细胞提供

• 发表时间: 2021
• 作者: 今川澪;新城尊徳;山下明子;佐藤晃平;瀬々起朗;西村優輝;川上賢太郎;岩下未咲;西村英紀;田中慧介，田中準一，相澤 怜，田中麻友，上野博夫，美島健二，山本松男
• 通讯作者: 田中慧介，田中準一，相澤 怜，田中麻友，上野博夫，美島健二，山本松男

Mechanisms of junctional epithelial homeostasis revealed by the accumulation of knowledge

知识积累揭示的连接上皮稳态机制

• DOI: 10.2329/perio.64.121
• 发表时间: 2022
• 期刊: Nihon Shishubyo Gakkai Kaishi (Journal of the Japanese Society of Periodontology)
• 作者: Hoshikawa Yoshimasa;Momma Eri;Hoshino Shintaro;Kawami Noriyuki;Kitasako Yuichi;Ikeda Masaomi;Iwakiri Katsuhiko;相澤 怜，田中準一，美島健二，山本松男
• 通讯作者: 相澤 怜，田中準一，美島健二，山本松男

Porphyromonas gingivalis由来LPSが不死化接合上皮細胞の細胞機能に及ぼす影響

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对永生化连接上皮细胞功能的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: Caiqi Cheng;Jun Zhou;Ruiying Chen; Yo Shibata;Reina Tanaka;Jun Wang;Jiaming Zhang;相澤 怜，田中慧介，田中準一，菅野真莉加，美島健二，山本松男
• 通讯作者: 相澤 怜，田中慧介，田中準一，菅野真莉加，美島健二，山本松男