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DNAチップを用いたヒト有細胞セメント質由来細胞特異的遺伝子発現パターンの解析

使用 DNA 芯片分析源自人细胞牙骨质的细胞特异性基因表达模式

基本信息

批准号：
13771309
负责人：
山本松男
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771309/
关键词：
セメント質 DNAチップ遺伝子発現骨芽細胞

项目摘要

平成14年度は、セメント質由来細胞および正常骨芽細胞で発現している遺伝子の発現について、配列既知のプローブ遺伝子を結合させたメンブレン型DNAアレイにより検出・比較した。遺伝子発現の包括的解析のため、セメント質由来細胞および正常骨芽細胞からトータルRNAの分離を行った。正常骨芽細胞に関しては、骨芽細胞分化のマーカーであるアルカリフォスファターゼ遺伝子、オステオカルシン遺伝子の発現を指標に判断し、前骨芽細胞から骨芽細胞へ分化段階であることが推察された。ヒト有細胞セメント質由来細胞に関しては、アルカリフォスファターゼ遺伝子の発現は骨芽細胞に比較すると低いことが確認された。それぞれの細胞から分離したRNAサンプルを33P-ATPで標識し、イメージアナライザーを用いて画像解析を行ったところ、約1100種類のうち、40種類の遺伝子について発現様式に差が認められた。通法に従いPCR法によりDNAアレイ解析の結果を確認したところ、セメント質由来細胞ではIGFBP2の発現が認められず、一方で正常骨芽細胞では強いシグナルを検出した。検討対象を広げ、同意を得た患者口腔内から採取した歯槽骨骨芽細胞、顎骨骨細胞とも比較検討したところ、やはり骨由来細胞ではIGFBP2の発現が認められ、IGFBP2がセメント質由来細胞と骨組織を構成する細胞との識別マーカーに利用できる可能性が示唆された。さらに、セメント質由来細胞、正常骨芽細胞、歯周組織より分離した歯根膜細胞、骨膜細胞、歯肉線維芽細胞、さらには免疫系細胞株で、セメント質形成をはじめ硬組織形成に深く関与すると考えられているGDF-5に対する検討したところ、歯根膜細胞やセメント細胞でプロテオグリカンの産生が増え、Bリンパ球系細胞でアポトーシスが誘導されることが判明し、これらは各細胞での遺伝子発現パターンの多様性を反映するものと推察された。

In 2014, the development of DNA from cells of different origin and normal bone bud cells was investigated. The results showed that the development of DNA from cells of different origin and normal bone bud cells was similar to that of normal bone bud cells. The development of DNA includes the analysis of DNA from cells and the isolation of DNA from normal bone bud cells. Normal bone bud cells are related to the differentiation of bone bud cells, and the differentiation of bone bud cells is determined by the index of the development of bone bud cells. A cell of origin is identified by comparing the development of a cell with that of a bone bud. About 1100 species of RNA and 40 species of RNA were identified by 33P-ATP. The results of DNA analysis by PCR method were confirmed. IGFBP2 was detected in cells derived from bone marrow and normal bone bud cells. The detection of IGFBP2 in bone marrow cells, bone marrow cells and bone tissue is possible. In this paper, the root membrane cells, periosteal cells, tooth line cells, immune system cell lines, root membrane cells and tooth line cells were isolated from bone marrow derived cells, normal bone bud cells and peridental tissues. The root membrane cells and tooth line cells were isolated from bone marrow derived cells and periosteal tissues. The diversity of gene expression in B cell line is reflected in the detection of gene expression in B cell line.