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無限分裂化歯髄幹細胞を用いた象牙質・歯髄複合体の炎症応答・再生メカニズムの解析

利用无限分裂牙髓干细胞分析牙本质-牙髓复合体的炎症反应和再生机制

基本信息

批准号：
21K09910
负责人：
折本愛
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kyushu Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでに、ヒト歯髄幹細胞に変異型サイクリン依存性キナーゼ4(CDK4R24C)、サイクリンD1(CyclinD1)、テロメア逆転写酵素(TERT)の3 種類の遺伝子の発現により、分化能力および元の染色体パターンを維持したまま細胞分裂が劇的に加速される効率の良い無限分裂ヒト歯髄由来幹細胞hDPSC-K4DTを作出している。しかし、変異型 CDK4、サイクリン D、TERT の定常的導入細胞は、強い細胞増殖を誘導するが、その強い細胞増殖が細胞分化を阻害する可能性がある。そのため、薬剤の有無によって、変異型 CDK4、サイクリン D の発現を ON/OFF できる薬剤誘導型無限分裂ヒト歯髄幹細胞を改変を試みた。変異型 CDK4、サイクリン D のON/OFFを可逆的に調節できる薬剤誘導型無限分裂ヒト歯髄幹細胞の樹立のために、ドキシサイクリン (Dox) 誘導型の変異型 CDK4及びサイクリン D の両遺伝子の発現レトロウイルスとTERTを発現する混合レトロウイルス溶液を作製し、濃縮後、ヒト歯髄幹細胞に感染を行った。感染後の細胞をDox を投与する群としない群に分けて細胞増殖活性を測定した。詳細には、開始時に同じの細胞数を 35 mm dish へ播種し、１日、３日、４日と培養後、ウェルの細胞をトリプシン処理し、剥離した。全てのウェルに存在した細胞数を計測した。Dox を投与した群では、Dox依存的な無限分裂歯髄幹細胞の増殖能の制御が観察された。さらに、改変細胞の骨分化誘導能力をqPCRとアリザリンレッド染色にて検討したところ、既存のhDPSC-K4DTと比較して、有意に高い骨分化誘導能を持つことが示唆された。

This is not true of the cell-dependent gene 4 (CDK4R24C), the reverse transcriptase D1 (CyclinD1), the reverse transcriptional enzyme (TERT), and the reverse transcriptional enzyme (TERT). The ability to differentiate, the ability of chromosomes to maintain cell division, the rate of accelerated cell division, the rate of cell division, the origin of cell division, the origin of cell hDPSC-K4DT, the ability to maintain cell division. Phenotypic CDK4, phenotype D, TERT steady entry into the cell, strengthening the cellular differentiation, blocking the possibility of cell differentiation. There are many different types of CDK4, such as wireless communication, wireless communication, and wireless communication. There is no limit to the number of splitters in the ON/OFF system. The type of CDK4, the type of reversible TERT, the type of unlimited division, the type of cell, the type of cell, the type of CDK4, the type of cell, the type of CDK4, the type of cell, the cell, Please tell me that the cell is infected. After infection, the Dox was injected into the cells and the colony activity was measured. At the beginning, the same number of cells will be sown at 35 mm dish. After training on the 1st, 3rd and 4th, the cells will be treated and stripped off. There is a calculation of the number of cells in the whole system. Dox population population and Dox-dependent unlimited mitotic cell colonization can control the population population. The ability to guide the differentiation of bone in qPCR cells, the ability of bone differentiation, the ability of staining and staining, the comparison of existing bone markers, and the intention of high bone differentiation.

项目成果

期刊论文数量（7）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

The transcriptome of wild-type and immortalized corneal epithelial cells.

DOI：
10.1038/s41597-021-00908-9
发表时间：
2021-05-07
期刊：
Scientific data
影响因子：
9.8
作者：
Furuya K;Wu T;Orimoto A;Sugano E;Tomita H;Kiyono T;Kurose T;Takai Y;Fukuda T
通讯作者：
Fukuda T

Establishment of human airway epithelial cells with doxycycline-inducible cell growth and fluorescence reporters

建立具有强力霉素诱导细胞生长和荧光报告基因的人气道上皮细胞

DOI：
10.1007/s10616-021-00477-0
发表时间：
2021
期刊：
Cytotechnology
影响因子：
2.2
作者：
Orimoto Ai;Takahashi Kohei;Imai Masaki;Kiyono Tohru;Kawaoka Yoshihiro;Fukuda Tomokazu
通讯作者：
Fukuda Tomokazu

変異型CDK4,サイクリンD1,TERTの３遺伝子導入による無限分裂ヒト歯髄幹細胞の樹立．

通过引入突变CDK4、细胞周期蛋白D1和TERT基因建立无限分裂的人牙髓干细胞。

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
折本　愛;北村知昭
通讯作者：
北村知昭

歯髄再生療法研究に有用な無限分裂ヒト歯髄幹細胞の樹立．

建立无限分裂的人牙髓干细胞，可用于牙髓再生治疗的研究。

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
折本　愛;北村知昭
通讯作者：
北村知昭

Transcriptome analysis to identify the downstream genes of androgen receptor in dermal papilla cells.

DOI：
10.1186/s12863-021-01018-6
发表时间：
2022-01-04
期刊：
BMC genomic data
影响因子：
1.9
作者：
Furuya K;Fujibayashi S;Wu T;Takahashi K;Takase S;Orimoto A;Sugano E;Tomita H;Kashiwagi S;Kiyono T;Ishii T;Fukuda T
通讯作者：
Fukuda T