舌癌WPOI-5の成立と予後を決定する癌微小環境の解析

点击翻译按钮获取中文摘要

近年、癌細胞の様式分類の1つであるWorst Pattern of Invasion（WPOI）が、舌癌患者の予後予測に有用であることが分かってきており、特に「浸潤先端部の胞巣集団から１mm以上離れた遊離胞巣が存在している状態」を示す病型“WPOI-5”では、患者生存率低下との関連が認められる。本研究では、口腔癌スフェロイドをマウス舌組織に移植した担癌マウスを作製することで、WPOI-5病態解析モデルの解析を目指している。口腔癌スフェロイドをマウス舌組織に移植した際の挙動を知るため、低接着性培養プレートにより作製した口腔癌スフェロイドをハイドロゲルに埋入・培養して、癌細胞の動態観察を試みた。ハイドロゲル埋入後の口腔癌スフェロイドの変化は、埋入方法や基質ゲルの種類によって異なっており、マトリゲル-Type 1コラーゲンの混合ハイドロゲル中に口腔癌スフェロイドを混ぜ込んで培養する方法が、培養期間中のスフェロイド構造の維持、構成細胞の生存に最適であった。また、口腔癌スフェロイド単独でハイドロゲル内に埋入した場合、口腔癌オルガノイド辺縁の癌細胞には核の偏在など極性変化が観察されたものの、ハイドロゲル内への侵入は仮足形成に留まっていたことから、口腔癌スフェロイドと線維芽細胞との共培養（口腔癌オルガノイド培養）に実験方法を変更した。口腔癌オルガノイド培養では、ハイドロゲル内に埋入する口腔癌スフェロイド/線維芽細胞の数、ゲル中の基質濃度が、癌細胞の挙動に差を生じさせていることを明らかにした。一部の口腔癌細胞株では、癌細胞がハイドロゲル内に索状浸潤する様子も捉えられていることから、in vitroにおけるWPOI-5病態モデルとして応用可能と考えている。