舌癌WPOI-5の成立と予後を決定する癌微小環境の解析

决定舌癌形成及预后的癌症微环境分析WPOI-5

• 批准号: 21K10053
• 负责人: 工藤 朝雄
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10053/
• 关键词: 舌扁平上皮癌; WPOI-5; 口腔癌スフェロイド; オルガノイド培養; ハイブリッドEMT; 組織立体構築

近年、癌細胞の様式分類の1つであるWorst Pattern of Invasion（WPOI）が、舌癌患者の予後予測に有用であることが分かってきており、特に「浸潤先端部の胞巣集団から１mm以上離れた遊離胞巣が存在している状態」を示す病型“WPOI-5”では、患者生存率低下との関連が認められる。本研究では、口腔癌スフェロイドをマウス舌組織に移植した担癌マウスを作製することで、WPOI-5病態解析モデルの解析を目指している。口腔癌スフェロイドをマウス舌組織に移植した際の挙動を知るため、低接着性培養プレートにより作製した口腔癌スフェロイドをハイドロゲルに埋入・培養して、癌細胞の動態観察を試みた。ハイドロゲル埋入後の口腔癌スフェロイドの変化は、埋入方法や基質ゲルの種類によって異なっており、マトリゲル-Type 1コラーゲンの混合ハイドロゲル中に口腔癌スフェロイドを混ぜ込んで培養する方法が、培養期間中のスフェロイド構造の維持、構成細胞の生存に最適であった。また、口腔癌スフェロイド単独でハイドロゲル内に埋入した場合、口腔癌オルガノイド辺縁の癌細胞には核の偏在など極性変化が観察されたものの、ハイドロゲル内への侵入は仮足形成に留まっていたことから、口腔癌スフェロイドと線維芽細胞との共培養（口腔癌オルガノイド培養）に実験方法を変更した。口腔癌オルガノイド培養では、ハイドロゲル内に埋入する口腔癌スフェロイド/線維芽細胞の数、ゲル中の基質濃度が、癌細胞の挙動に差を生じさせていることを明らかにした。一部の口腔癌細胞株では、癌細胞がハイドロゲル内に索状浸潤する様子も捉えられていることから、in vitroにおけるWPOI-5病態モデルとして応用可能と考えている。

In recent years, the Worst Pattern of Invasion (WPOI) of cancer cells has been used in the prediction of tongue cancer patients, especially the disease type "WPOI-5", which indicates that the cell aggregation at the tip of invasion is more than 1mm away from the free cells. This study provides guidance on the control of oral cancer and the analysis of WPOI-5 pathologies. Oral cancer tissue transplantation, low adhesion culture, oral cancer tissue implantation, culture, cancer cell dynamics The change of oral cancer tissue after implantation, the method of implantation, the Type of matrix, the method of culture, the maintenance of tissue structure during culture, and the optimal survival of constituent cells In addition, in the case of oral cancer, the method of co-culture of oral cancer cells (oral cancer culture) is improved. The number of oral cancer cells and the concentration of matrix in oral cancer cells are different from those in oral cancer cells. A number of oral cancer cell lines have been found to have funicular infiltrations in oral cancer cells, and WPOI-5 has been found to have pathological infiltrations.

项目成果

口腔癌スフェロイドの表現型スクリーニングと３次元形態解析

口腔癌球体表型筛选及三维形态分析

• 发表时间: 2022
• 作者: Shan Qiusheng;Takabatake Kiyofumi;Kawai Hotaka;Oo May;Sukegawa Shintaro;Fujii Masae;Nakano Keisuke;Nagatsuka Hitoshi;Takahiro Kanno;栗林伸行，児島さやか，合田啓之，徳善紀彦，日野聡史，中城公一，内田大亮;工藤朝雄，埴 太宥，川本沙也華，佐藤かおり，田谷雄二，添野雄一
• 通讯作者: 工藤朝雄，埴 太宥，川本沙也華，佐藤かおり，田谷雄二，添野雄一

低接着性培養による口腔癌スフェロイド形成と3次元形態・免疫表現型の解析

低粘附培养口腔癌球体形成及3D形态和免疫表型分析

• 发表时间: 2021
• 作者: Shan Qiusheng;Takabatake Kiyofumi;Omori Haruka;Kawai Hotaka;Oo May;Sukegawa Shintaro;Fujii Masae;Inada Yasunori;Sano Sho;Nakano Keisuke;Nagatsuka Hitoshi;工藤 朝雄，埴 太宥，川本沙也華，佐藤かおり，田谷 雄二，添野 雄一
• 通讯作者: 工藤 朝雄，埴 太宥，川本沙也華，佐藤かおり，田谷 雄二，添野 雄一