唾液腺細胞のCdc42依存性恒常性維持機構に着目した、新規放射線防御機構の解明

阐明一种新型辐射防护机制，重点关注唾液腺细胞 Cdc42 依赖性稳态机制

• 批准号: 21K10126
• 负责人: 設楽 彰子
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Asahi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10126/
• 关键词: 放射線; Cdc42; 唾液腺; ドライマウス; 放射線性唾液腺障害; 放射線障害

我々はまず放射線照射による細胞反応を解析した。C57BL/6マウスに全身麻酔をかけた後、卓上型Ｘ線照射装置 MX-80Laboを用いて、左側顎下腺・耳下腺領域に9GyのX線を照射した。頭頸部以外はタングステンシートを用いて放射線を遮蔽した。放射線照射１週間後に全身麻酔下でピロカルピン刺激による唾液分泌を測定した。唾液分泌量はピロカルピン刺激後2分おきに30秒間の唾液分泌量を計測した。その結果、放射線照射あり・なしで唾液分泌量に有意差はなかった。Mist1CreERT2マウスは、Mist1遺伝子領域をcreERT2融合遺伝子に置き換えたマウスである。Mist1遺伝子は唾液腺の腺房細胞、小腸のパネート細胞など、ほとんどの漿液性分泌細胞でも発現している。我々はこのマウスとCdc42 floxマウスを掛け合わせたMist1-Cdc42 floxマウスを作成した。このマウスはタモキシフェン誘導性のCre媒介組換えにより、Cdc42 floxed配列が唾液腺腺房細胞（Cre発現細胞）で欠失する。FM4-46はスチリル色素で、クラスリン依存性エンドサイトーシスあるいはバルクエンドサイトーシスを検出できる。我々は野生型マウスまたはCdc42ノックアウトマウスより摘出した耳下腺に対してFM4-64FXを1分、5分、10分取り込ませた。その後組織を固定し、共焦点顕微鏡（Leica TCS SP8）にて蛍光を観察した。その結果Cdc42ノックアウト細胞ではエンドサイトーシスが促進されることが明らかになった。エンドサイトーシスは障害を受けた細胞膜を修復する働きがある。これらの結果から、Cdc42はエンドサイトーシスを調節することにより、放射線照射により障害を受けた細胞膜を修復する役割がある可能性が示唆された。

I 々 々 まず irradiate による cells and then 応を analyze た. After general anesthesia of C57BL/6 ウスに, the superior X-ray irradiation device MX-80Laboを was used to irradiate 酔を た with に て and に9Gy X-rays in the left submandibular gland - subauditory gland area. For areas outside the head and neck, タ タ グステ シ シ トを トを should be shielded by を て radiation を. One week after radiation exposure, に general anesthesia 酔, でピロカ ピ ピ, <s:1> stimulation of による saliva secretion, を measurement of <s:1> た. The amount of saliva secreted is measured by a を meter at 2 minutes お に に and 30 seconds after stimulation. The amount of saliva secreted is measured by a を meter. Youdaoplaceholder0 results, radiation exposure あ · な で で intentional difference in saliva secretion に な な った った. Mist1CreERT2 ウス ウス and Mist1 伝 subdomain をcreERT2 fusion 伝 subdomain に are set and replaced with えた ウスである ウスである. Mist1 posthumous son 伝 は salivary gland の gland cells, small intestine の パ ネ ー ト cells な ど, ほ と ん ど の serous secretory cells で も 発 now し て い る. I 々 は こ の マ ウ ス と Cdc42 flox マ ウ ス を hang け close わ せ た Mist1 - Cdc42 flox マ ウ ス を made し た. こ の マ ウ ス は タ モ キ シ フ ェ ン induced の Cre media group in え に よ り, Cdc42 floxed match column が salivary gland room cells (Cre 発 now cells) で owe lost す る. FM4-46 は ス チ リ で, ク ル pigment ラ ス リ ン dependency エ ン ド サ イ ト ー シ ス あ る い は バ ル ク エ ン ド サ イ ト ー シ ス を 検 out で き る. I 々 は wild-type マ ウ ス ま た は Cdc42 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス よ り pick the し た parotid に し seaborne fx を て FM4-64 1, 5 points, 10 divide り 込 ま せ た. Youdaoplaceholder0 after そ, the tissue を is fixed and <s:1>, the confocal 顕 microscope (Leica TCS SP8) にて蛍 light を観 is examined and た is made. Results そ の Cdc42 ノ ッ ク ア ウ ト cells で は エ ン ド サ イ ト ー シ ス が promote さ れ る こ と が Ming ら か に な っ た. エ ン ド サ イ ト ー シ ス は handicap of を by け た membrane を repair す る 働 き が あ る. こ れ ら の results か ら, Cdc42 は エ ン ド サ イ ト ー シ ス を adjust す る こ と に よ り, radiation に よ り handicap of を by け た membrane を repair す る service cut が あ が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Arginase 1 may regulate the lacrimal and saliva secretion in mice.

精氨酸酶 1 可以调节小鼠的泪液和唾液分泌。

• 发表时间: 2023
• 作者: Yuta Ohno;Keitaro Satoh;Haruna Nagase;Akiko Shitara;Tetsuji Nakamoto;Masanori Kashimata
• 通讯作者: Masanori Kashimata

公開 マウス網膜障害後の涙腺遺伝子発現プロファイル

发表小鼠视网膜损伤后泪腺基因表达谱

• 发表时间: 2022
• 作者: 大野雄太;矢古宇智弘;佐藤慶太郎;長瀬春奈;設楽彰子;原英彰;柏俣正典
• 通讯作者: 柏俣正典

Insertion of circularly permuted cyan fluorescent protein into the ligand-binding domain of inositol 1,4,5-trisphosphate receptor for enhanced FRET upon binding of fluorescent ligand

将循环排列的青色荧光蛋白插入肌醇 1,4,5-三磷酸受体的配体结合域中，以增强荧光配体结合时的 FRET

• DOI: 10.1016/j.ceca.2022.102668
• 发表时间: 2022
• 期刊: Cell Calcium
• 影响因子: 4
• 作者: Jahan Azmeree;Akter MST Tahmina;Takemoto Kiwamu;Oura Tai;Shitara Akiko;Semba Shingo;Nezu Akihiro;Suto Satoshi;Nagai Takeharu;Tanimura Akihiko
• 通讯作者: Tanimura Akihiko

マウス唾液腺・涙腺におけるアルギナーゼ1の外分泌能調節メカニズムの解明

阐明小鼠唾液腺和泪腺中精氨酸酶1外分泌功能的调节机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 大野雄太;長瀬春奈;佐藤慶太郎;設楽彰子;中本哲自;柏俣正典
• 通讯作者: 柏俣正典

Retinal damage alters gene expression profile in lacrimal glands of mice

视网膜损伤改变小鼠泪腺的基因表达谱

• DOI: 10.1016/j.jphs.2022.02.007
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Pharmacological Sciences
• 影响因子: 3.5
• 作者: Ohno Yuta;Yako Tomohiro;Satoh Keitaro;Nagase Haruna;Shitara Akiko;Hara Hideaki;Kashimata Masanori
• 通讯作者: Kashimata Masanori