細胞老化抑制による、新しいNASH治療法の開発

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HepG2細胞を用いた、定量的な細胞老化の系の確立を行った。培養液に過酸化水素（H2O2）250μMあるいはドキソルビシン（DOX）0.5μM を加えて2時間インキュベートした後に、各種フィトケミカルを添加した培地に交換し、６日目に細胞を回収して細胞溶解液を作成してSA β-GALアッセイを行った。スルフォラファン、クルクミン、ケルセチン、フィセチン、ゲニステインについて、非刺激下および、H2O2あるいはDOX刺激下での細胞老化に与える影響を検討した。20μMのスルフォラファンは、無刺激下の細胞老化を約20％抑制し、H2O2刺激下では約28％抑制、DOX刺激下では約15％抑制したが、100μMでは強い細胞障害性を示した。50μMのクルクミンは、無刺激下の細胞老化を約51％抑制し、DOX刺激では約61％抑制したが、H2O2刺激では細胞老化を約75％促進する活性を示した。ケルセチン添加群では、非刺激下で約48%の細胞老化を抑制したが、H2O2刺激下では明らかな抑制効果は認められなかった。フィセチン添加群では、非刺激下で細胞老化を約64%抑制し、またDOX刺激下では約50%抑制し、さらにH2O2刺激下では約44%抑制効果が認められた。ゲニステイン添加群では、DOX刺激下で約24%の抑制効果が認められた。また、HepG2細胞で脂質貯留低減効果が示唆された、スルフォラファン（0.015％、S群）およびクルクミン（0.3％、C群）をNASHモデルマウスに与えその効果を評価した。21週目に肝臓を摘出しmRNA発現を評価したところ、S群ではPPARαやCPT1など脂質酸化系遺伝子発現の増強、C群ではFASやACC１など脂質合成系遺伝子発現の低下が認められ、NASHの進展抑制に効果がある可能性が示唆された。