抗体レパトア解析を用いた新たなワクチン有効性評価手法の開発

利用抗体库分析开发新的疫苗功效评估方法

• 批准号: 19K17947
• 负责人: 佐野 芳
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-11-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K17947/
• 关键词: インフルエンザ; IgA抗体; 経鼻ワクチン; インフルエンザワクチン; 抗体レパトア; 抗体; インフルエンザウイルス; ワクチン

本研究は「経鼻不活化インフルエンザワクチンと注射型インフルエンザワクチンの2種類のワクチンの接種により誘導された抗体集団が異なる」という作業仮説に基づき、抗体機能および抗体遺伝子の両面からのアプローチにより、経鼻ワクチンおよび注射型ワクチンにより誘導された抗体集団（レパトア）を明らかにすることを目標としている。前年度までは、経鼻不活化インフルエンザワクチンおよび注射型不活化インフルエンザワクチンの接種者由来形質芽細胞から抽出した抗体遺伝子をもとに作製したモノクローナルIgG抗体のうち、インフルエンザウイルスのヘマグルチニン（HA）に結合活性を示す抗体クローンを中心に解析を行ったが、本年度はノイラミニダーゼ（NA）への結合活性がELISAにより認められた抗体クローンのより詳細な解析を行った。まず、昆虫細胞系を用いた組み換えNAタンパク質の作製系を習得し、各抗体クローン間でのNAへの結合活性を比較した。その後、各抗体クローンのノイラミニダーゼ阻害（NI）活性を測定し、抗ウイルス活性の特徴により、抗NA抗体のグループ分けを行った。今後は、グループ分けを行った抗体クローンについて、その活性の違いを生み出す遺伝子的特徴や構造的特徴についてより詳細に検証していく予定である。また、今後実施予定のワクチン接種者の遺伝子レベルおよびタンパクレベルでの抗体レパトア解析に向け、次世代シークエンサーを用いた抗体遺伝子の網羅的解析方法および質量分析器の使用方法についてオンライン講習や専門家とのディスカッションを通じて理解を深め、実験計画を立てた。

This study was conducted to investigate the role of the antibody gene in the induction of the antibody population by inoculation of two types of inactivated antibodies, i.e., injectable antibodies and injectable antibodies. The antibody pool was induced by injection and injection. In the previous year, the inoculants of the inactivated virus and the inactivated virus were derived from the cytoplasmic germ cells, and the antibody gene was extracted from the cells. The binding activity of the IgG antibody was demonstrated by the analysis of the antibody gene in the center. This year, the binding activity of the antibody was analyzed in detail. To compare the binding activity of NA between different antibody groups, the working system of NA and insect cell lines was learned. After that, the activity of each antibody was determined, and the characteristics of anti-NA antibody activity were determined. In the future, we will examine the characteristics and structure of the antibody in detail. In the future, we will continue to conduct research on the analysis of antibody fragments in the vaccine vaccine

项目成果

経鼻接種型不活化ワクチンと皮下接種型不活化ワクチンにより誘導された抗インフルエンザ抗体の 質についての比較解析

鼻腔灭活疫苗与皮下灭活疫苗诱导抗流感抗体质量的比较分析

• 发表时间: 2019
• 作者: 佐野芳;黒澤信幸;齊藤慎二;相内章;鈴木忠樹; 磯部正治;長谷川秀樹
• 通讯作者: 長谷川秀樹

Anti-viral Functions by Steric Hindrance of HA and NA Observed in an Intranasal Vaccine Derived Influenza HA-stalk Reactive IgA Antibody

在鼻内疫苗衍生的流感 HA-stalk 反应性 IgA 抗体中观察到 HA 和 NA 空间位阻的抗病毒功能

• 发表时间: 2019
• 作者: Sano K;Saito S;Suzuki T;Kotani O;van Riet E;Ainai A;Tabata K;Takahashi Y;Yokoyama M;Sato H;and Hasegawa H
• 通讯作者: and Hasegawa H

HA-stalk Reactive Secretory IgA Antibodies Exhibit Anti-viral Activity by Steric Hindrance of Viral HA and NA

HA-stalk 反应性分泌型 IgA 抗体通过病毒 HA 和 NA 的空间位阻表现出抗病毒活性

• 发表时间: 2019
• 作者: Sano K;Saito S;Suzuki T;Kotani O;van Riet E;Ainai A;Tabata K;Takahashi Y;Yokoyama M;Sato H;and Hasegawa H
• 通讯作者: and Hasegawa H