蛍光を発しないGFPホモログ(色素タンパク質)を利用した神経科学研究ツールの開発
使用非荧光 GFP 同系物(色素蛋白)开发神经科学研究工具
基本信息
- 批准号:20K06867
- 负责人:
- 金额:$ 2.75万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2020
- 资助国家:日本
- 起止时间:2020-04-01 至 2023-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
イシサンゴやイソギンチャクの仲間が有する色素タンパク質を哺乳類細胞に応用を試みるために、いくつかの色素タンパク質遺伝子を大腸菌を用いて発現させた結果、特に色が濃く、アルデヒドや有機溶媒に強い色素タンパク質として、ハイマツミドリイシAmiCP(濃紺色)を選択することができた。このAmiCP色素タンパク質をマウス脳に子宮内エレクトロポレーションで発現させると、発色のための処置を行わなくてもに通常の白色光下においてマウス脳皮質が紺色に着目した。そこで、Creドライバー依存的にAmiCPが発現するようなマウス個体を作成することを目指した。これまでに世界中で数多くのCreドライバーラインが開発されており、それらと交配させることによって、特定の組織や細胞種をAmiCPで可視化することができるようになる。そのために次のような特徴をもったコンストラクトを作成した。◯AmiCP色素タンパク質遺伝子のコドンをマウスにおける発現に最適化 ◯TetOffシステムを内部に利用して単なるCAGプロモーターよりも強力に発現を誘導できる(Ai140 (Addgeneから入手したAi140(TIT2L-GFP-ICL-tTA2) targeting vectorを改変した) ◯Cre/loxPシステムによってCre依存的にAmiCPが発現する ◯マウスゲノムのセーフハーバーサイトTIGREにゲノム編集技術CRISPR-Cas9システムを利用してノックインできる(そのためにホモロジーアームを約800bpずつ付与した)ノックイン個体を得るために、このDNAコンストラクトとCas9-tracrRNA-gRNA複合体をマウス受精卵前核(378個)に微量注入した。生まれてきた14匹の尻尾DNAを解析したが、残念ながら組換え体は1匹も得られなかった。
イシサンゴやイソギンチャクの中间が有する色タンパク性をmammalian cellsに応用みるために、いくつかの色タンパク缝子をcoliform を用いて発The result is now, the color is thick, the organic solvent is strong and the color is strong, and the color is strongとして、ハイマツミドリイシAmiCP (dense cyanosis) を选択することができた.このAmiCP pigment タンパクquality をマウス脳に intrauterine エレクトロポレーションで発 appear させると,発色のためのtreatmentを行わなくてもにusuallyのwhite light under the においてマウス脳 cortex がcyanese color に目した.そこで、Creドライバーdepends on the にAmiCP が発appears and するようなマウス individually をproduces することを目见した. In the world of でれまでにで多くのCreドライバーラインが开発されており、それらとMATCHさせることによって、Specific tissue and cell species をAmiCPでVisualizationすることができるようになる.そのために时のような特徴をもったコンストラクトを成した. ◯AmiCP pigments are optimized ◯TetOff システムを internal use して単なるCAG プロモーターよりもstrong に発appears inducing できる (Ai140 (Addgene has acquired the Ai140(TIT2L-GFP-ICL-tTA2) targeting vector) ◯Cre/loxPシステムによってCre-dependent AmiCPが発成する ◯マウスゲノムのセーフハーバーサイトTIGREにゲノム editing technology CRISPR-C as9システムをutilizationしてノックインできる(そのためにホモロジーアームをapproximately 800b pずつ用した)ノックイン individuallyを得るために、このDNAコンストラクトとCas9 -The tracrRNA-gRNA complex was injected into the prenucleus of the fertilized egg (378 pieces) in a small amount.生まれてきた14 pieces of の尻尾DNA をanalyze したが, and zannin ながらcombination of 1 piece of body は got られなかった.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
笠原 和起其他文献
笠原 和起的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('笠原 和起', 18)}}的其他基金
第三の酸化還元補酵素を利用する新規酵素の同定と機能解析
利用第三种氧化还原辅酶的新型酶的鉴定和功能分析
- 批准号:
14780499 - 财政年份:2002
- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
松果体細胞を用いた概日リズムの追跡と分子解析
使用松果体细胞进行昼夜节律跟踪和分子分析
- 批准号:
98J05228 - 财政年份:1998
- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
相似国自然基金
莱菔硫烷经胆汁酸及其受体调控肠道巨噬细胞极化改善溃疡性结肠炎作用机制研究
- 批准号:MS25H260021
- 批准年份:2025
- 资助金额:0.0 万元
- 项目类别:省市级项目
FGF21通过CTL1介导的胆碱稳态调控线粒体自噬对帕金森病的保护机制研究
- 批准号:MS25H310003
- 批准年份:2025
- 资助金额:0.0 万元
- 项目类别:省市级项目
受分数布朗运动驱动的多值随机微分方程动力学行为研究
- 批准号:QN25A010002
- 批准年份:2025
- 资助金额:0.0 万元
- 项目类别:省市级项目
几类离散概率模型的长时间行为
- 批准号:QN25A010006
- 批准年份:2025
- 资助金额:0.0 万元
- 项目类别:省市级项目
随机非局部全变差流的适定性及长时间行为
- 批准号:QN25A010014
- 批准年份:2025
- 资助金额:0.0 万元
- 项目类别:省市级项目
度量测度空间上基于狄氏型和p-energy型的热核理论研究
- 批准号:QN25A010015
- 批准年份:2025
- 资助金额:0.0 万元
- 项目类别:省市级项目
两类拟线性Schrödinger方程正规化解的存在性与多重性研究
- 批准号:QN25A010018
- 批准年份:2025
- 资助金额:0.0 万元
- 项目类别:省市级项目
两类高斯过程驱动的混杂自交互扩散的长时间行为研究
- 批准号:QN25A010030
- 批准年份:2025
- 资助金额:0.0 万元
- 项目类别:省市级项目
基于深度学习的滤泡性甲状腺癌术前智能诊断模型研究
- 批准号:QN25A010034
- 批准年份:2025
- 资助金额:0.0 万元
- 项目类别:省市级项目
流场中多尺度Pull型自驱动颗粒聚集行为的研究
- 批准号:QN25A020005
- 批准年份:2025
- 资助金额:0.0 万元
- 项目类别:省市级项目
相似海外基金
An implantable biosensor microsystem for real-time measurement of circulating biomarkers
用于实时测量循环生物标志物的植入式生物传感器微系统
- 批准号:
2901954 - 财政年份:2028
- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Studentship
Exploiting the polysaccharide breakdown capacity of the human gut microbiome to develop environmentally sustainable dishwashing solutions
利用人类肠道微生物群的多糖分解能力来开发环境可持续的洗碗解决方案
- 批准号:
2896097 - 财政年份:2027
- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Studentship
A Robot that Swims Through Granular Materials
可以在颗粒材料中游动的机器人
- 批准号:
2780268 - 财政年份:2027
- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Studentship
Likelihood and impact of severe space weather events on the resilience of nuclear power and safeguards monitoring.
严重空间天气事件对核电和保障监督的恢复力的可能性和影响。
- 批准号:
2908918 - 财政年份:2027
- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Studentship
Proton, alpha and gamma irradiation assisted stress corrosion cracking: understanding the fuel-stainless steel interface
质子、α 和 γ 辐照辅助应力腐蚀开裂:了解燃料-不锈钢界面
- 批准号:
2908693 - 财政年份:2027
- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Studentship
Field Assisted Sintering of Nuclear Fuel Simulants
核燃料模拟物的现场辅助烧结
- 批准号:
2908917 - 财政年份:2027
- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Studentship
Assessment of new fatigue capable titanium alloys for aerospace applications
评估用于航空航天应用的新型抗疲劳钛合金
- 批准号:
2879438 - 财政年份:2027
- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Studentship
Developing a 3D printed skin model using a Dextran - Collagen hydrogel to analyse the cellular and epigenetic effects of interleukin-17 inhibitors in
使用右旋糖酐-胶原蛋白水凝胶开发 3D 打印皮肤模型,以分析白细胞介素 17 抑制剂的细胞和表观遗传效应
- 批准号:
2890513 - 财政年份:2027
- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Studentship
CDT year 1 so TBC in Oct 2024
CDT 第 1 年,预计 2024 年 10 月
- 批准号:
2879865 - 财政年份:2027
- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Studentship
Understanding the interplay between the gut microbiome, behavior and urbanisation in wild birds
了解野生鸟类肠道微生物组、行为和城市化之间的相互作用
- 批准号:
2876993 - 财政年份:2027
- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Studentship














{{item.name}}会员




