The development of detection system for abnormal synuclein using a chaperone-like protein

使用类伴侣蛋白检测异常突触核蛋白的系统的开发

• 批准号: 20K06887
• 负责人: 丹治 邦和
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020 至 2022
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K06887/
• 关键词: 神経変性疾患; パーキンソン病; リン酸化; シヌクレイノパチー; 認知症; シヌクレイン; 検出方法

αシヌクレイン(Syn)はパーキンソン病(PD)、レビー小体型認知症(DLB)および多系統萎縮症(MSA)の病態に深く関与する分子である。これらの疾患を早期に診断するためには、コスト面および簡易さの点から血液中のバイオマーカーが必要とされ、実際に血液中や髄液中のSynを指標にした検出キットも市販されている。しかし、健常者の脳にある正常なSynと患者脳内の異常Synを区別できないため検出の精度が低く、結果が不安定なため臨床診断に応用するまでには至っていない。我々はこれまでに異常Synを区別・検出する方法を確立し、異常Synを認識する分子NUB1を同定してきた。特に異常Synと強く結合するリン酸化NUB1の存在を証明した。そこでこのNUB1を目印にすることで異常Synの検出法の確立を目指している。昨年度までにMSAに認められるSyn凝集体では高率に細胞小胞と共存することを見出した。この知見から細胞内外の小胞を回収することで異常Synを濃縮できる可能性がある。これまでに患者血清・脳脊髄液中の異常Synの定量技術確立のため、細胞内外の小胞を回収法の模索を行い、上述の手法で回収したサンプルからNUB1を用いて免疫沈降を模索している。今年度は、レビー小体病(PDおよびDLB)におけるSyn凝集と小胞構造の関連について検討した。すべてのレビー小体関連構造物に小胞構造が認められたが、異常Synによる標識率はMSAに比べ有意に低かった。この違いは、MSAとレビー小体病におけるSynフィブリルの凝集性や伝播性、細胞毒性の違いを反映している可能性が高く、脂質膜を用いたSyn凝集モデルはMSAの封入体形成を擬えるモデルと考えられることを指摘した。さらに、培養細胞から径200～500nmの小胞が抽出、精製できることを確認した。

Alpha シ ヌ ク レ イ ン (Syn) は パ ー キ ン ソ ン disease (PD), レ ビ ー small body size of cognitive disorder (DLB) お よ び multiple system atrophy (MSA) の pathological に deep く masato and す る molecular で あ る. を こ れ ら の disease early diagnosis に す る た め に は, コ ス ト surface お よ び simple さ の point か ら blood の バ イ オ マ ー カ ー が necessary と さ れ や, the event be に blood marrow fluid の Syn を index に し た 検 the キ ッ ト も city vendor さ れ て い る. し か し, health often の 脳 に あ る normal な Syn と 脳 patients with abnormal の within the Syn を difference で き な い た め 検 の が く low precision, the results が unrest な た め clinical diagnosis に 応 with す る ま で に は to っ て い な い. I 々 は こ れ ま で に abnormal Syn を difference, 検 out す を る method established し, abnormal Syn を know す る molecular NUB1 を with fixed し て き た. Special に anomaly Synと strong く binding するリ <s:1> acidification NUB1 に existence を proof た た た そ こ で こ の NUB1 を mesh printing に す る こ と で abnormal Syn の の 検 out method to establish を refers し て い る. Yesterday annual ま で に MSA に recognize め ら れ る Syn coagulation collective で は high rate に cells in small cell と coexistence す る こ と を shows し た. <s:1> ら knowledge of ら intracellular and extracellular <s:1> small cell を reproducing する <s:1> とで abnormal Synを concentration で る る る possibility がある. こ れ ま で に patients serum, 脳 の anomalies in spinal marrow liquid Syn の quantitative techniques to establish の た め, cells inside and outside の vesicular を 収 method の back mould line cable を い, the above の gimmick で back 収 し た サ ン プ ル か ら NUB1 を with い て immune sink を die line し て い る. This year, <s:1> and レビ レビ small body disease (PDおよびDLB)におけるSyn agglomeration と small cell structure <s:1> is related, に た て検 て検 て検 て検 て検 discuss た. す べ て の レ ビ ー corpuscle masato even structure に vesicular structure が recognize め ら れ た が, abnormal Syn に よ る は MSA に identification rate is lower than べ intentionally に か っ た. こ の violations い は, MSA と レ ビ ー corpuscle disease に お け る Syn フ ィ ブ リ ル の agglutinative や 伝 sowing, cytotoxicity の violations い を reflect し て い likely が る く, lipid membrane を い た Syn agglutination モ デ ル は MSA の seal in body form を quasi え る モ デ ル と exam え ら れ る こ と を blame し た. Youdaoplaceholder0, cultured cells ら ら 200-500nm small cells が extraction, refinement で る る とを とを confirmation of た.

项目成果

トランスジェニック非ヒト動物、発光検出方法、補助剤のスクリーニング方法及び医薬のスクリーニング方法

转基因非人动物、发光检测方法、辅助剂筛选方法以及药物筛选方法

• 发表时间: 2022

Neuropathology of Multiple System Atrophy, a Glioneuronal Degenerative Disease

• DOI: 10.1007/s12311-022-01407-2
• 发表时间: 2022-04-26
• 期刊: CEREBELLUM
• 影响因子: 3.5
• 作者: Wakabayashi，Koichi;Miki，Yasuo;Mori，Fumiaki
• 通讯作者: Mori，Fumiaki

Phosphorylation of Tau at Threonine 231 in Patients With Multiple System Atrophy and in a Mouse Model

多系统萎缩患者和小鼠模型中 Tau 苏氨酸 231 的磷酸化

• DOI: 10.1093/jnen/nlac082
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Neuropathology &amp; Experimental Neurology
• 作者: Tanaka Makoto T;Tanji Kunikazu;Miki Yasuo;Ozaki Taku;Mori Fumiaki;Hayashi Hideki;Kakita Akiyoshi;Wakabayashi Koichi
• 通讯作者: Wakabayashi Koichi

Sulforaphane Increase Mitochondrial Biogenesis-Related Gene Expression in the Hippocampus and Suppresses Age-Related Cognitive Decline in Mice.

• DOI: 10.3390/ijms23158433
• 发表时间: 2022-07-29
• 期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES
• 影响因子: 5.6
• 作者: Shimizu, Sunao;Kasai, Shuya;Yamazaki, Hiromi;Tatara, Yota;Mimura, Junsei;Engler, Mate Janos;Tanji, Kunikazu;Nikaido, Yoshikazu;Inoue, Takuro;Suganuma, Hiroyuki;Wakabayashi, Koichi;Itoh, Ken
• 通讯作者: Itoh, Ken

The pathological substrate of memory impairment in multiple system atrophy

多系统萎缩记忆障碍的病理基础

• 发表时间: 2022
• 作者: Yasuo Miki;Kunikazu Tanji;Mari Tada;Fumiaki Mori;Helen Ling;Akiyoshi Kakita;Janice L Holton;Thomas T Warner;Koichi Wakabayashi
• 通讯作者: Koichi Wakabayashi