海馬CA1ー膨大後部皮質間の単シナプス抑制性神経回路構造の分子基盤を探る

探索海马CA1与壶腹后皮层之间单突触抑制性神经回路结构的分子基础

基本信息

  • 批准号:
    20K06899
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.75万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2020
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2020-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

海馬CA1より膨大後部皮質へ投射し、この領野間の単シナプス神経回路を構築するGABA作動性ニューロンに着目し研究を行っている。このGABA作動性ニューロンにはシナプス性膜タンパクをコードするNetrinG1が特異的に発現している。そこでGABA作動性ニューロン特異的にNetrinG1を欠損するトランスジェニックマウス系統(‘NetrinG1 flox/vGAT-cre)を用いてその軸索走行を検証する為に、海馬へCre依存的に蛍光タンパクを発現するAAVベクターを注入した。組織学的解析の結果NetrinG1の欠損により軸索走行に異常が起きることが確認できた。関連文献より、この軸索走行の異常には軸索伸展時の膨大後部皮質におけるマイクログリアの動態が影響を与えているのではないかと考え、マイクログリアのマーカーであるIba1に対する抗体染色を行い検証した。結果としては積極的にマイクログリアが関わるという結論を得ることはできなかった。実際には海馬GABA作動性ニューロンの軸索は割合として低くNetrinG1-マイクログリア連動が起きるとしても本欠損マウスでの検証は難しいと考えた。しかし本実験の遂行過程で膨大後部皮質の発達期における特徴的なマイクログリアの分布パターンを認めた、解剖学会にて発表した。この軸索走行異常が引き起こす神経ネットワークの異常を明らかにするために、越シナプス的に感染するAAV1ベクター並びに越シナプス的に輸送されるWGA:mCherryをつかい、NetrinG1欠損マウスの海馬―膨大後部皮質間の後シナプス細胞の分布を検証している。また、この投射型GABA作動性ニューロンの分子特性をスクリーニングし、リーリンや他のいくつかの分子がこの細胞に発現することが明らかとなった。本細胞の分子特性がだいぶ明らかになってきた。
Hippocampal CA1 よ り) at the back of the cortex し へ projection, こ の brought between wild の 単 シ ナ プ ス 経 loop を god build す る GABA actuation sex ニ ュ ー ロ ン に the mesh line し research を っ て い る. こ の GABA actuation sex ニ ュ ー ロ ン に は シ ナ プ ス sex film タ ン パ ク を コ ー ド す る NetrinG1 が specific に 発 now し て い る. そ こ で GABA actuation sex ニ ュ ー ロ ン specific に NetrinG1 を owe loss す る ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス system (' NetrinG1 Flox/vGAT - cre) を い て そ の axonal direction を 検 card す る に, hippocampal へ cre dependent に 蛍 light タ ン パ ク を 発 now す る AAV ベ ク タ ー を injection し た. The histological analysis <s:1> results of NetrinG1 showed that the lesion was deficient and によ the axonal course was に abnormal starting from が る た とが とが confirmed で た た た. Masato even literature よ り, こ の axonal direction の abnormal に は axon stretch の) at the back of the cortex に お け る マ イ ク ロ グ リ ア の dynamic が influence を and え て い る の で は な い か と え test, マ イ ク ロ グ リ ア の マ ー カ ー で あ る Iba1 に す seaborne る antibody staining line を い 検 card し た. Results と し て は positive に マ イ ク ロ グ リ ア が masato わ る と い う conclusion を must る こ と は で き な か っ た. Be interstate に は hippocampal GABA actuation sex ニ ュ ー ロ ン の axon は cut close と し て low く NetrinG1 - マ イ ク ロ グ リ ア が up muscle き る と し て も this owe loss マ ウ ス で の 検 card は difficult し い と exam え た. し か し this be 験 の carries out the process で expands at the back of the cortex の 発 phase of に お け る of 徴 な マ イ ク ロ グ リ ア の distribution パ タ ー ン を recognize め た, anatomical society に て 発 table し た. こ の axon walk line abnormal が lead き up こ す god 経 ネ ッ ト ワ ー ク の abnormal を Ming ら か に す る た め に and more シ ナ プ ス に infected す る AAV1 ベ ク タ ー and び に more シ ナ プ ス に conveying さ れ る WGA: mCherry を つ か い, NetrinG1 owe damage マ ウ ス の -) at the back of the hippocampus cortex after の between シ ナ プ ス cell の points B を検 certifies て て る る. ま た, こ の projection type GABA actuation sex ニ ュ ー ロ ン の molecular properties を ス ク リ ー ニ ン グ し, リ ー リ ン や he の い く つ か の molecular が こ の cells に 発 now す る こ と が Ming ら か と な っ た. The <s:1> molecular characteristics of this cell are がだ がだ ぶ and ら になって and た.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
マウス膨大後部皮質の生後発達におけるIba1陽性小膠細胞の分布
小鼠壶腹后皮质出生后发育过程中Iba1阳性小胶质细胞的分布
  • DOI:
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    宮下俊雄
  • 通讯作者:
    宮下俊雄
海馬CA1-RS抑制性神経回路の形成に関わるnetrin-G1の機能解析
Netrin-G1参与海马CA1-RS抑制性神经回路形成的功能分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    宮下俊雄;冨岡良平;吉村由美子;糸原重美;萩原治夫
  • 通讯作者:
    萩原治夫
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