興奮性ニューロンと抑制性ニューロンとを識別するトランスジェニック動物の開発

开发区分兴奋性和抑制性神经元的转基因动物

• 批准号: 20019010
• 负责人: 柳川 右千夫
• 金额: $ 5.7万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20019010/
• 关键词: 抑制性ニューロン; トランスジェニックマウス; 蛍光蛋白質; 系統; 発現; ノックインマウス

脳は、興奮性と抑制性のニューロンで構成される神経ネットワークの集まりからできている。しかしながら、興奮性ニューロンと抑制性ニューロンの両者ともin vitroおよびin vivoで正確に同定することは一般に困難である。抑制性ニューロンを黄色蛍光蛋白質、Venusで標識したトランスジェニックマウス(VGAT-Venusマウス)4系統を樹立、繁殖させた。各系統の脳について、Western法、in situ hybridization法で解析した結果、系統39でVenusの発現が最も強く、その発現分布もVGATの分布と類似していた。そこで、系統39の組織学的解析をさらに進め、VGAT-Venusマウスの有用性について検討した。抗GFP抗体と抗GABA抗体を用いた2重免疫染色法で、大脳皮質、海馬(CAl領域と歯状回)、小脳皮質の各領域について、Venus分子がGABAニューロン特異的に局在するかどうか検討した。海馬歯状回では共局在する細胞が75%程度であったが、海馬CAl領域(97%)、大脳皮質(96%)、小脳皮質(99%)では高率で発現の一致を観察した。従って、VGAT-Venusマウス系統39は、上記領域におけるGABAニューロンの機能や形態を研究する上で有用な研究資材と期待される。VGATは、GABAニューロンとグリシンニューロンの両方に発現し、背側蝸牛神経核では両方のニューロンが含まれている。そこで、系統39の背側蝸牛神経核で、抗GFP抗体と抗GABA抗体あるいは抗グリシン抗体を用いた2重免疫染色法でVenusとGABAあるいはグリシンの共局在を調べた。Venus陽性細胞の中で、グリシン陽性が85%、GABA陽性が9%であった。一方、グリシン陽性細胞とGABA陽性細胞はいずれもVenusが発現していた。従って、背側蝸牛神経核抑制性ニューロンの研究にもVGAT-Venusマウス系統39は有用であると結論した。

In addition, excitatory and inhibitory factors constitute the central nervous system. The excitatory and inhibitory effects are usually difficult to determine in vitro and vivo. The four systems of inhibitory Ni ー Ronan yellow fluorescent protein and Venus de logo (VGAT-Venus S) have been established and propagated. The results of analysis by Western method and in situ hybridization method show that the occurrence of Venus in system 39 is the strongest, and the distribution of VGAT is similar. The histological analysis of system 39 is discussed in detail. Anti-GFP antibody and anti-GABA antibody were detected by double immunostaining in various areas of cortex, hippocampus (CA1 area and dentate gyrus) and cortex, Venus molecule and GABA specific area. 75% of the cells in the hippocampus were found to be co-located, while 97% of the cells in the hippocampus CA1 domain, 96% in the large cortex and 99% in the small cortex were found to be co-located. VGAT-Venus system 39 is expected to provide useful research materials for the study of GABA's functional morphology in the field. VGAT, GABA, GABA In addition, anti-GFP antibody and anti-GABA antibody were used to regulate the expression of Venus GABA in 39 dorsal snails. Venus positive cells were 85% and GABA positive cells 9% respectively. The expression of GABA and Venus was detected in both positive and negative cells. The study of VGAT-Venus system is useful.

项目成果

Distribution and role of Kv3.1b in neurons in the medial septal diagonal band area

Kv3.1b在中隔对角带区神经元中的分布及作用

• 发表时间: 2010
• 期刊: Neuroscience 166
• 作者: Henderson Z;Yanagawa Y;et al.
• 通讯作者: et al.

Nigral Inhibition of GABAergic Neurons in Mouse Superior Colliculus

• DOI: 10.1523/jneurosci.3263-08.2008
• 发表时间: 2008-10-22
• 期刊: JOURNAL OF NEUROSCIENCE
• 影响因子: 5.3
• 作者: Kaneda, Katsuyuki;Isa, Kaoru;Isa, Tadashi
• 通讯作者: Isa, Tadashi

GFPを利用した遺伝子改変マウスの開発

使用 GFP 开发转基因小鼠

• 发表时间: 2009
• 作者: 大坪紀子;神崎亮平;高橋宏知;柳川右千夫
• 通讯作者: 柳川右千夫

Random Walk Behavior of Migrating Cortical Interneurons in the Marginal Zone: Time-Lapse Analysis in Flat-Mount Cortex

• DOI: 10.1523/jneurosci.5446-08.2009
• 发表时间: 2009-02
• 期刊: The Journal of Neuroscience
• 作者: Daisuke H. Tanaka;Mitsutoshi Yanagida;Yan Zhu;S. Mikami;T. Nagasawa;J. Miyazaki;Y. Yanagawa;K. Obata;F. Murakami

抑制性ニューロンにVenus蛍光タンパク質を発現させたトランスジェニックマウス

在抑制性神经元中表达金星荧光蛋白的转基因小鼠

• 发表时间: 2008
• 作者: 王英;柿崎利和;斉藤憲史;海老原利枝;阪上洋行;加藤めぐみ;平林真澄;柳川右千夫
• 通讯作者: 柳川右千夫