ゴルジ体微小管の構築制御に基づく癌細胞の集団的浸潤機構の解明

基于高尔基体微管组装调控阐明癌细胞集体侵袭机制

• 批准号: 20K07575
• 负责人: 西田 満
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07575/
• 关键词: ゴルジ体微小管; アセチル化チューブリン; 安定化微小管; ゴルジ体由来微小管; 大腸癌; 集団浸潤; がん細胞浸潤; 細胞極性; 細胞骨格

これまでに、IFT20がゴルジ体の浸潤側への再配置を制御していることやリーダー細胞における安定化微小管の形成に関与していることを見出した。これらの知見を踏まえ、本年度はIFT20がゴルジ体由来微小管の安定化・極性化を制御する機構を理解するため、ゴルジ体由来微小管の動態をライブセルイメージングによって解析した。まず、複数の大腸癌細胞株に微小管プラス端マーカーであるEB1-GFPの発現プラスミドを導入し、安定発現株を複数樹立した。これら　の各細胞株について、ライブセルイメージング解析によりEB1-GFPの移動速度を計測した。その結果どの細胞株も同じスピードでEB1-GFPが移動することが確認されたため、以降はDLD1細胞の１クローンを主に用いて解析した。IFT20が浸潤細胞の微小管動態にどのような役割を担っているのか検討するため、EB1-GFP発現DLD1細胞の2D invasion assayにおいて、リーダー細胞でのライブイメージング解析を行った。EB1-GFPのトラッキング解析のため、MatLabおよびアドインソフト のU-Trackを用いた。各トラックの浸潤方向に対する角度（浸潤方向に伸長するものが0°、中心側へ伸長するものが180°となる）を計測した結果、コントロール細胞に比べIFT20ノックダウン細胞では浸潤方向（0°方向）に伸長する微小管の数が有意に低下した。さらに、IFT20をノックダウンしたリーダー細胞において、微小管伸長が一時的に停止する頻度が増加した。一方、微小管の伸長速度自体はIFT20ノックダウンによる変化は認められなかった。以上の結果から、DLD1細胞の集団的浸潤において、IFT20はリーダー細胞における極性化した微小管伸長を制御していることが示唆された。

Therefore, it has been shown that IFT20 can control the reconfiguration of the infiltration side of the tube, which is related to the formation of stabilizing microtubes in both peripheral cells. This year, we will analyze the dynamics of micro-tubes from the perspective of stability and polarization of micro-tubes. The expression of EB1-GFP was introduced into a plurality of colorectal cancer cell lines, and a plurality of stable cells were established. The speed of EB1-GFP migration was measured by cell analysis. As a result, the EB1-GFP cell line was identified and analyzed in the presence of DLD1 cells 2D invasion assay of DLD1 cells developed by EB1-GFP and analysis of microtubule dynamics of IFT20 cells. EB1-GFP's U-Track, MatLab's U-Track As a result of the measurement of the angle of elongation in the direction of infiltration (0° in the direction of infiltration and 180° in the direction of center side elongation), the number of microtubes in the cells was intentionally lower than that in the cells in the direction of infiltration (0° direction). The frequency of temporary stop of small tube elongation increases. The elongation speed of a square and a micro tube is automatically lifted 20 times. The above results show that the invasion of DLD1 cells and the polarization of IFT20 cells inhibit the elongation of microtubes.

项目成果

Characterization of morphological alterations in micropapillary adenocarcinoma of the lung using an established cell line

• DOI: 10.3892/or.2021.8230
• 发表时间: 2022-01-01
• 期刊: ONCOLOGY REPORTS
• 影响因子: 4.2
• 作者: Sonoda, Dai;Kamizaki, Koki;Satoh, Yukitoshi
• 通讯作者: Satoh, Yukitoshi

c-Src mediated phosphorylation and activation of KIF1C promotes invadopodia maturation in cancer cells

c-Src 介导的 KIF1C 磷酸化和激活促进癌细胞侵袭伪足成熟

• 发表时间: 2021
• 作者: 佐事 武;西田 満;遠藤 光晴;岡田 康志;南 康博
• 通讯作者: 南 康博

Rif regulates Wnt5a-Ror1 signaling to induce filopodia-mediated progression of lung adenocarcinoma cells.

Rif 调节 Wnt5a-Ror1 信号传导以诱导丝状伪足介导的肺腺癌细胞进展。

• 发表时间: 2022
• 作者: Koki Kamizaki;Michiru Nishita;Yasuhiro Minami
• 通讯作者: Yasuhiro Minami

Autonomous and intercellular chemokine signaling elicited from mesenchymal stem cells regulates migration of undifferentiated gastric cancer cells

间充质干细胞引发的自主和细胞间趋化因子信号传导调节未分化胃癌细胞的迁移

• DOI: 10.1111/gtc.12933
• 发表时间: 2022
• 期刊: Genes to Cells
• 影响因子: 2.1
• 作者: Okamoto Daiki;Yamauchi Natsuko;Takiguchi Gosuke;Nishita Michiru;Kakeji Yoshihiro;Minami Yasuhiro;Kamizaki Koki
• 通讯作者: Kamizaki Koki

Rif低分子量Gタンパク質の細胞内局在と機能の制御機構

Rif低分子G蛋白亚细胞定位及功能的调控机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 渡部祐亮;星京香;紙崎孝基;澁谷浩司;南康博;西田満
• 通讯作者: 西田満