胸部悪性腫瘍における免疫微小環境のモニタリングに関する研究

胸部恶性肿瘤免疫微环境监测研究

• 批准号: 20K07688
• 负责人: 米田 和恵
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07688/
• 关键词: 悪性胸膜中皮腫; 遺伝子解析; 免疫微小環境; 原発性肺癌; 循環腫瘍細胞

悪性腫瘍とその周囲の免疫環境は、免疫チェックポイント阻害薬等の免疫を介した治療効果予測に一定の有用性が期待されるが、組織に基づく免疫状況の変化を経時的に捉えることは困難である。本研究では、原発性肺癌や悪性胸膜中皮腫などの胸部悪性腫瘍における腫瘍局所の免疫微小環境を、繰り返し採取可能な血液や胸水などの液性検体を用いてモニタリングすることが可能かどうか検討を行いたい。まず、腫瘍局所における腫瘍細胞及び免疫関連細胞の状況を調べるため、悪性胸膜中皮腫のホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）検体を用いて検討を行っている。悪性胸膜中皮腫の生検時あるいは手術時の組織FFPE検体のHE染色及び免疫染色により腫瘍細胞及び腫瘍周囲のリンパ球集簇状況を確認した。続いて同一切片で遺伝学的な評価を行うため、FFPE検体の切片からDNA/RNAを抽出し、次世代シークエンサーによるターゲットシークエンス及びコピー数解析を実施した。この際、腫瘍細胞含有比率を上げるため顕微鏡下でレーザーマイクロダイセクション（LCM）を行い、腫瘍部分とリンパ球集簇部分をそれぞれ分取した。ターゲットシークエンス及びコピー数解析ではそれぞれ特徴的な変化が検出された。しかしながら腫瘍間質に浸潤するリンパ球はLCMによる分取が難しく、新たな細胞分取方法の検討を行っている。腫瘍周囲の免疫細胞の分取によりその特徴を反映する液性マーカーの探索を進めたい。

悪 sex is swollen sores と そ の weeks 囲 の は immune environment, immune チ ェ ッ ク ポ イ ン ト resistance against 薬 の immune を interfaces such as し た treatment services に fruit to test certain の usefulness が expect さ れ る が, organization に づ く immune status の variations change を when 経 に catch え る こ と は difficult で あ る. This study で は, original 発 lung cancer や 悪 swollen in fibrous pleural な ど の chest 悪 sex is swollen sores に お け る swollen sores bureau の immune tiny environment を, Qiao り return し may take な や blood pleural effusion な ど の liquid sex を 検 body with い て モ ニ タ リ ン グ す る こ と が may か ど う か 検 line for を い た い. ま ず, swollen sores bureau に お け る swollen sores cells and the status of the び immune masato even cell の を adjustable べ る た め, 悪 swollen in pleural の ホ ル マ リ ン fixed パ ラ フ ィ ン embedding (FFPE) 検 body を い て 検 line for を っ て い る. 悪 sex pleura skin swelling の when unripe 検 あ る い は surgery の organization FFPE 検 body の HE dyeing and び immune に よ り swollen sores cells and び swollen sores weeks 囲 の リ ン パ ball cluster status を confirm し た. 続 い て traces of the same slice で 伝 learn な review 価 を line う た め, FFPE 検 body の slice か ら を DNA/RNA extraction し, next generation シ ー ク エ ン サ ー に よ る タ ー ゲ ッ ト シ ー ク エ ン ス and び コ ピ ー number parsing を be applied し た. こ の interstate, swollen sores cells contain ratio on を げ る た め 顕 micro microscopically で レ ー ザ ー マ イ ク ロ ダ イ セ ク シ ョ ン (LCM) を い, swollen sores と リ ン パ ball cluster part を そ れ ぞ れ divide し た. タ ー ゲ ッ ト シ ー ク エ ン ス and び コ ピ ー number parsing で は そ れ ぞ れ of 徴 な variations change が 検 out さ れ た. し か し な が ら swollen sores interstitial infiltrates に す る リ ン パ ball は LCM に よ る divide が difficult し く, new た な cells divide method の 検 line for を っ て い る. The 囲 <s:1> immune cells <e:1> around the ulcer were collected to show the によ そ そ <s:1> characteristics を to reflect the する liquidality of the <s:1> カ and explore the を into the めた によ.