原発性肺癌における末梢血循環腫瘍細胞は造腫瘍能を持つのか?

研究目的:循環腫瘍細胞(Circulating Tumor Cell,以下CTC)は、上皮性抗原EpCAMを用いた半自動CTC検出システムCellSearchの開発により再現性・定量性が確保され、転移性乳癌等における予後予測因子としての有用性が確認されている。しかしながら、CTCの生物学的性質については未解明であり、実際に転移能を持っているのか、あるいは単に原発巣から脱落した細胞なのかについての検討は不十分である。本研究では、捕捉したCTCの造腫瘍能を確認することによって遠隔転移に対する治療の標的を明らかにし、治療効果判定の指標としての有用性を高めることを目的とした。研究方法:上記の事項を検証するために、まず肺癌細胞株を用いて新しい実験系を構築し、次に臨床検体におけるCTCの生着・増殖能を検証した。臨床検体については、原発巣と捕捉した細胞の遺伝子学的プロファイルを比較した。研究成果:肺癌細胞株を用いた血液からの回収・培養条件の検討では、健常人末梢血に混入させた肺癌細胞株を上皮抗原EpCAMによる磁気分離にて回収・培養し、条件の検討を行った。また、細胞表面マーカーについて免疫染色を行い、上皮性マーカーの発現を確認した。次に臨床検体による検討では、肺癌患者の末梢血及び肺葉切除後の肺静脈血から同様にEpCAM陽性細胞を捕捉して培養を試みたが、増殖性の細胞は見られなかった。この時同量の血液中に検出されたCTCはそれぞれ0-1個、>10個であった。肺静脈血中のEpCAM陽性細胞群のうち原発巣と同じ遺伝子変異を有する細胞が検出された。結論:肺癌患者末梢血液中のEpCAM陽性細胞は今回の条件下での生育能は低く、上皮性細胞がより多く含まれた肺静脈血でも同様であった。一部では原発巣と同じ遺伝子変異が検出されたことから原発巣由来であると考えられるが、増殖能は確認できなかった。

研究目的:循環腫瘍細胞(Circulating Tumor Cell,以下CTC)は、上皮性抗原EpCAMを用いた半自動CTC検出システムCellSearchの開発により再現性・定量性が確保され、転移性乳癌等における予後予測因子としての有用性が確認されている。しかしながら、CTCの生物学的性質については未解明であり、実際に転移能を持っているのか、あるいは単に原発巣から脱落した細胞なのかについての検討は不十分である。本研究では、捕捉したCTCの造腫瘍能を確認することによって遠隔転移に対する治療の標的を明らかにし、治療効果判定の指標としての有用性を高めることを目的とした。研究方法:上記の事項を検証するために、まず肺癌細胞株を用いて新しい実験系を構築し、次に臨床検体におけるCTCの生着・増殖能を検証した。臨床検体については、原発巣と捕捉した細胞の遺伝子学的プロファイルを比較した。研究成果:肺癌細胞株を用いた血液からの回収・培養条件の検討では、健常人末梢血に混入させた肺癌細胞株を上皮抗原EpCAMによる磁気分離にて回収・培養し、条件の検討を行った。また、細胞表面マーカーについて免疫染色を行い、上皮性マーカーの発現を確認した。次に臨床検体による検討では、肺癌患者の末梢血及び肺葉切除後の肺静脈血から同様にEpCAM陽性細胞を捕捉して培養を試みたが、増殖性の細胞は見られなかった。この時同量の血液中に検出されたCTCはそれぞれ0-1個、>10個であった。肺静脈血中のEpCAM陽性細胞群のうち原発巣と同じ遺伝子変異を有する細胞が検出された。結論:肺癌患者末梢血液中のEpCAM陽性細胞は今回の条件下での生育能は低く、上皮性細胞がより多く含まれた肺静脈血でも同様であった。一部では原発巣と同じ遺伝子変異が検出されたことから原発巣由来であると考えられるが、増殖能は確認できなかった。