原発性肺癌における末梢血循環腫瘍細胞は造腫瘍能を持つのか?

原发性肺癌的外周血循环肿瘤细胞是否具有致瘤潜力？

• 批准号: 24931041
• 负责人: 米田 和恵
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24931041/
• 关键词: 原発性肺癌; 循環腫瘍細胞

研究目的:循環腫瘍細胞(Circulating Tumor Cell,以下CTC)は、上皮性抗原EpCAMを用いた半自動CTC検出システムCellSearchの開発により再現性・定量性が確保され、転移性乳癌等における予後予測因子としての有用性が確認されている。しかしながら、CTCの生物学的性質については未解明であり、実際に転移能を持っているのか、あるいは単に原発巣から脱落した細胞なのかについての検討は不十分である。本研究では、捕捉したCTCの造腫瘍能を確認することによって遠隔転移に対する治療の標的を明らかにし、治療効果判定の指標としての有用性を高めることを目的とした。研究方法:上記の事項を検証するために、まず肺癌細胞株を用いて新しい実験系を構築し、次に臨床検体におけるCTCの生着・増殖能を検証した。臨床検体については、原発巣と捕捉した細胞の遺伝子学的プロファイルを比較した。研究成果:肺癌細胞株を用いた血液からの回収・培養条件の検討では、健常人末梢血に混入させた肺癌細胞株を上皮抗原EpCAMによる磁気分離にて回収・培養し、条件の検討を行った。また、細胞表面マーカーについて免疫染色を行い、上皮性マーカーの発現を確認した。次に臨床検体による検討では、肺癌患者の末梢血及び肺葉切除後の肺静脈血から同様にEpCAM陽性細胞を捕捉して培養を試みたが、増殖性の細胞は見られなかった。この時同量の血液中に検出されたCTCはそれぞれ0-1個、>10個であった。肺静脈血中のEpCAM陽性細胞群のうち原発巣と同じ遺伝子変異を有する細胞が検出された。結論:肺癌患者末梢血液中のEpCAM陽性細胞は今回の条件下での生育能は低く、上皮性細胞がより多く含まれた肺静脈血でも同様であった。一部では原発巣と同じ遺伝子変異が検出されたことから原発巣由来であると考えられるが、増殖能は確認できなかった。

Objective: To confirm the usefulness of Circulating tumor cell (CTC) anti-epithelial antigen EpCAM in the development of semi-automatic CTC detection system for Cell search, reproducibility and quantification, and to ensure the prediction of metastatic breast cancer. The biological properties of CTC are not yet understood. In fact, the transfer energy is maintained. In addition, the original cells are shed. The biological properties of CTC are not fully understood. The purpose of this study is to confirm the tumor-forming ability of captured CTCs, clarify the target of treatment in remote locations, and increase the usefulness of indicators for determining treatment outcomes. Methods: The above items were examined and verified by using lung cancer cell lines to construct new systems and to demonstrate CTC growth and proliferation in clinical models. Clinical pathology, genetic engineering, and cellular genetics Research results: lung cancer cell line with blood recovery, culture conditions, healthy human peripheral blood mixed with lung cancer cell line epithelial antigen EpCAM, magnetic isolation, recovery, culture conditions Immunostaining of the cell surface was performed to confirm the development of epithelial cells. In addition, the peripheral blood of lung cancer patients and pulmonary venous blood after lobectomy were also collected and cultured. The number of CTCs in the blood was 0-1,>10. EpCAM positive cell populations in pulmonary venous blood were found to be distinct from each other. Conclusion: EpCAM positive cells in peripheral blood of lung cancer patients have low fertility under current conditions, while epithelial cells have high fertility and pulmonary venous blood. A part of the original development, the same generation, the different generation, the original development, the origin, the growth, the confirmation