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迷走神経遠心性神経による消化管SIP Syncytium制御機構の解析

迷走神经传出神经控制胃肠道SIP合胞体机制分析

基本信息

批准号：
20K08355
负责人：
玉田宏美
金额：
$ 2.83万
依托单位：
University of Fukui (2022)Nagoya University (2020-2021)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、前年度に確立した迷走神経背側核へのGFP発現ウイルスインジェクションによる神経線維のラベリングと、消化管内に走行する当該GFP発現線維の同定後にFIB/SEM解析に進める光-電子相関顕微鏡観察法（Correlative Light-Electron Microscopy: CLEM法)において、より精度を高めるための手法の検討を行った。これまでに用いていた物理的マーキングよりピンポイントの線維の同定法を目指し、ビブラトームを用いたSemi-thin sectionによる試料作製を試みた。その結果、ビブラトームでのsection作製時に通常用いるアガロースやゼラチンなどの包埋剤と、消化管の切片組織との親和性が弱い点、また神経線維の走行がドット状に観察されるため同定が困難である点など、改善点は未だ必要であるものの、比較的観察領域が狭い部分に限局されるFIB/SEM観察において適した標本サイズで解析を効率的に進めることができると期待された。また、SIP Syncytiumを構成するInterstitial Cells of Cajal(ICC：カハールの介在細胞)やplatelet-derived growth factor receptor α(PDGFRα：線維芽細胞)にGFPがそれぞれ発現するトランスジェニックマウスを用いた実験を開始し、ウイルスなどのトレーサーインジェクションとの組み合わせにより、染色することなく、迷走神経線維とSyncytiumのインタラクションを同定することが可能となった。さらに、並行して進めている、迷走神経線維の出入り口である腸間膜に存在するマクロファージなどの免疫系細胞とPDGFRα陽性細胞との関連についても、損傷モデルを用いるなどして明らかにした他、本研究課題の解析法の主軸であるFIB/SEMを利用した神経細胞の解析も進めた。

The dorsal vagus nerve nucleus and the digestive tract were established this year and the previous year. When the linear dimensions of the GFP were determined, FIB/SEM analysis was carried out using Correlative light-electron microscopy. Light-Electron Microscopy: CLEM method), high accuracy, high precision, and high precision. The これまでに uses the いていたphysical マーキングよりピンポイントの line维の同定法を目知し、ビブラトームを用いたSemi-thin sectionによるsample productionをtestみた. When making その results and ビブラトームでのsection, we usually use いるアガロースやゼラチンなどのThe weak point of affinity of the sectioned tissue of the digestive tract and the weak point of the line dimension of the digestive tract are the same. It is difficult to determine the point of improvement, it is not necessary to improve the point, and the field of comparative observation is narrow and partial, and it is limited. FIB/SEM inspection is the best way to analyze specimens and analyze them efficiently.また、SIP Syncytiumを constitutes the platelet-derived growth factor receptor α (PDGFRα: thread-dimensional bud cell) GFPジェニックマウスを用いた験をStartし、ウイルスなどのトレーサーインジェクションとの组み合わせにより, 色することなく, vagushen経线dimensionalとSyncytiumのインタラクションを同定することがpossibleとなった.さらに、parallel して入めている、vagus god 経线dimensional の出出り口である interenteric membrane にexisting There is a relationship between immune system cells and PDGFRα-positive cells in the immune systemについても、Damage モデルを用いるなどして明らかにした他、This research topicのThe main axis of analytical method is FIB/SEM and the analysis method of cells is used.