膜透過性ペプチドを用いた細胞死抑制による新たな抗敗血症薬の提案

提出使用膜渗透肽抑制细胞死亡的新型抗菌药物

• 批准号: 20K09231
• 负责人: 中林 修
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Toho University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K09231/
• 关键词: アポトーシス; cFLIP; MIB2; 敗血症; CPP

敗血症は、周術期管理において生命予後に大きな影響を及ぼす病態である。敗血症による血管内皮細胞の障害はアポトーシスであると考えられているが、詳細な細胞死メカニズムは不明である。さらに臨床開発を目的としモデル動物を用いてアポトーシス阻害剤の効果が検討されているが、現在のところ十分に効果的な薬剤は存在しない。アポトーシスおよびネクロプトーシス(制御されたネクローシス)を抑制する重要な因子としてcFLIPというタンパク質が知られている。申請者は、cFLIPに結合し安定化に関与する分子としてMIB2を見出た。本研究では、MIB2によるcFLIPの安定性が強化されることにより血管内皮細胞の障害が抑制されるかどうか調べる。さらに、cFLIPの安定性を強化させるような新たな敗血症治療薬の開発を行うことを目的とする。敗血症により全身で炎症が起こる際、障害を受けた臓器よりサイトカインが放出され、それが血管内皮細胞を傷害することによりさらなるサイトカイン放出が起こり、多臓器不全に至ることが明らかとなってきた。サイトカインによる血管内皮細胞の障害はアポトーシスと考えられ、アポトーシスの実行分子であるカスパーゼの阻害剤は実験動物を用いた敗血症モデルで検討されているが、期待された効果は得られていない。cFLIP分子内のMIB2結合領域に結合し、cFLIPを安定化させるペプチドを得るため、293T細胞を用いた発現系により、cFLIPとMIB2の一部を共発現させ、免疫沈降法により結合の検出を行った結果、結合領域は64アミノ酸残基まで絞り込むことができた。

Blood poisoning, period management, life after the big impact and disease Blood poisoning, vascular endothelial cell damage, blood poisoning, vascular endothelial cell damage, vascular endothelial cell damage For the purpose of clinical development, it is necessary to investigate the effects of anti-drug agents in animals, and the effects of anti-drug agents in animals. The key factors for controlling the quality of products are: The applicant is required to combine cFLIP with MIB2. In this study, the stability of cFLIP was enhanced and the inhibition of vascular endothelial cell damage was regulated by MIB2. To enhance the stability of cFLIP, the development of a new treatment for sepsis should be carried out. Blood poisoning causes systemic inflammation, damages, organ damage, vascular endothelial cell damage, organ damage, organ damage, and organ damage. The vascular endothelial cells are damaged by the blood poisoning in animals, and the results are expected. cFLIP molecule MIB2 binding domain binding, cFLIP stabilization, selection, detection of 293T cells, co-detection of cFLIP and MIB2, immunoprecipitation method, binding domain 64 acid residues, detection, detection.

项目成果

cFLIPのユビキチン化による新たなアポトーシス抑制機構の解析

cFLIP泛素化抑制凋亡新机制分析

• 发表时间: 2020
• 作者: 清水覚司;岩下成人;石原真理子;河島愛莉奈;西脇侑子;赤澤舞衣;岩本貴志;中西美保;松本富吉;福井聖;北川裕利;廣田弘毅;中林修
• 通讯作者: 中林修