活性型ビタミンD3による歯根膜細胞のTNF誘導アポトーシス抑制効果に対する解析

活化维生素D3对TNF诱导的牙周膜细胞凋亡的抑制作用分析

• 批准号: 20K09951
• 负责人: 金谷 聡介
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K09951/
• 关键词: 活性型ビタミンD3; 歯根膜細胞; アポトーシス抑制

歯周病巣や根尖病巣局所において、腫瘍壊死因子(TNF-alpha)は炎症を惹起するだけでなくアポトーシスを誘導する代表的な因子でもある。近年、歯周病および根尖病変とアポトーシスの関連について報告されている。歯根膜は歯根膜線維芽細胞、骨芽細胞、セメント芽細胞の供給源となり、歯周組織の維持や再生に重要である。活性型ビタミンD3は腸管からのカルシウムの吸収を促進し、骨の成長や維持に必要であるが、歯周組織の健康の維持にも影響を与えている可能性があることが報告されている。100ng/ml濃度のTNF-alpha存在下でヒト歯根膜細胞を1～100nM濃度の活性化ビタミンD3で刺激したところ、10nM濃度で12時間後および24時間後の生存率が有意に上昇した。200ng/ml濃度のTNF-alpha存在下でも同様の結果がみられた。次に、TNF-alphaがヒト歯根膜細胞のアポトーシス誘導に及ぼす影響について解析を行った。1～500ng/ml濃度のTNF-alpha存在下でヒト歯根膜細胞を培養したところ、1ng/mlおよび10ng/ml濃度のTNF-alphaでは48時間培養後にアポトーシスは誘導されなかったが、100ng/ml、200ng/mlおよび500ng/ml濃度のTNF-alpha存在下では48時間後にアポトーシスが誘導された。しかしながら、活性化ビタミンD3でアポトーシスの抑制がみられなかった。また、TNF100ng/mlでも同様であった。一方、10nMおよび100nM濃度の活性化ビタミンD3刺激では72時間でOD値の低下がみられた。高濃度では細胞障害性があることも考えられるが、活性化ビタミンD3による3日刺激はアルカリフォスファターゼやオステオカルシン遺伝子の発現を顕著に増強することから、分化誘導されることにより増殖能が低下することが影響している可能性もあると考えられる。

肿瘤坏死因子（TNF-Alpha）是一种代表性因素，不仅引起炎症，而且还诱导牙周病变和局部顶端病变的凋亡。最近，据报道牙周疾病与顶端病变之间的关联性凋亡。牙周韧带可作为牙周韧带成纤维细胞，成骨细胞和胶质成纤维细胞的来源，对于牙周组织的维持和再生很重要。活性维生素D3可促进肠道的钙吸收，对于骨骼生长和维持是必要的，但据报道，这也可能影响牙周组织健康的维持。在100 ng/ml浓度的TNF-Alpha存在下，用1-100 nm浓度的活化维生素D3刺激人牙周韧带细胞，在12 nm浓度下，在12 nm浓度下的存活率显着增加，在12和24小时后显着增加。在浓度为200 ng/mL的情况下，在TNF-α存在下也观察到了相似的结果。接下来，分析了TNF-α对人牙周韧带细胞凋亡诱导的影响。当人类牙周韧带在1-500 ng/mL的TNF-α浓度下培养时，在48小时以1 ng/ml的孵育后未诱导凋亡，而TNF-Alpha的10 ng/ml浓度浓度为10 ng/ml，但在48小时后，在TNF-Alpha-limplatiation in 200 nga-pha/MoL中诱发了凋亡，诱发了凋亡。 TNF-α的Ng/ml浓度。但是，活化的维生素D3不能抑制凋亡。 TNF 100ng/ml也是如此。另一方面，当激活的维生素D3刺激在10 nm和100 nm浓度下，在72小时后，OD水平降低。尽管高浓度可能是细胞毒性的，但活化维生素D3的3天刺激显着增强了碱性磷酸酶和骨钙蛋白基因的表达，但诱导分化可能会影响增殖能力下降。