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S1Pによる歯乳頭由来幹細胞の象牙芽細胞分化誘導と歯髄血管再生療法への応用

S1P诱导牙乳头干细胞成牙本质细胞分化及其在牙髓血管再生治疗中的应用

基本信息

批准号：
20K09969
负责人：
松崎英津子
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Fukuoka Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K09969/
关键词：
再生歯内療法歯乳頭由来幹細胞 S1Pシグナル歯髄血管再生療法 S1P

项目摘要

昨年度に引き続き、マウス歯乳頭尖端前駆細胞 (iSCAP)に、S1PおよびBMP-9を添加し、象牙芽細胞分化に及ぼす影響について検討した。前年度、象牙芽細胞分化マーカー発現が安定しなかったため、石灰化誘導培地下で再検討し、S1P添加後1-14日の象牙芽細胞分化マーカーmRNA発現について解析した。Dentin sialophosphoprotein (DSPP)、Dentin matrix acidic phosphoprotein 1 (DMP-1) mRNA発現は、S1P、BMP-9添加により1日目から有意に増加した。Matrix extracellular phosphoglycoprotein (MEPE) は7日目から発現を認め、S1P、BMP-9添加により14日目で有意に増加した。次に、S1P受容体のひとつであるS1PR1の阻害剤W146を添加すると、S1PによるDSPP、DMP-1発現増加は有意に抑制され、MEPEも抑制傾向を示した。一方で、W146の添加は、BMP-9によるDSPP、DMP-1、MEPEの発現増加に影響を及ぼさなかった。また、DSPPのタンパク質分泌について、ELISA法により検討したところ、S1P添加により3日目で有意に増加した。この発現増加は、mRNA発現と同様にW146添加により有意に抑制された。他方、BMP-9添加により、DSPPタンパク質発現は7日目で増加したが、W146は影響を及ぼさなかった。また、iSCAPを脂肪細胞分化誘導培地下で培養すると脂肪滴が形成され、脂肪細胞に分化した。S1Pの添加により脂肪滴の形成は抑制され、W146を添加するとS1Pによる脂肪的形成抑制作用は阻害された。以上のことから、S1PR1シグナルがiSCAPの象牙芽細胞分化、脂肪細胞分化抑制に関与する可能性が考えられた。

Last year, iSCAP, S1P, BMP-9, ivory bud differentiation and shadow were introduced. In the previous year, the cell differentiation of ivory buds showed that it was stable, calcareous, underground, and 1-14 days after the addition of S1P, the ivory buds were differentiated and analyzed by mRNA. Dentin sialophosphoprotein (DSPP), Dentin matrix acidic phosphoprotein 1 (DMP-1) mRNA display, S1P, BMP-9 are added. Matrix extracellular phosphoglycoprotein (MEPE) for 7 days, please add S1P, BMP-9 for 14 days, and you intend to add more. Secondary, S1P receptacles were blocked by S1PR1, W146 was added to W146, S1P was added to DSPP, DMP-1 was intentionally suppressed, and MEPE suppressed. Party, W146, BMP-9, DSPP, DMP-1, MEPE, please add your name and add your name. For example, DSPP method, ELISA method, S1P, and S1P were added for 3 days. Now that you have increased the number of users, you can see that you have the same effect as W146. You are interested in suppressing the situation. The other party, the BMP-9 adds the price, the DSPP, the price, the price and the price. The cell differentiation of fat droplets and the differentiation of fat cells of fat droplets and fat droplets in iSCAP were studied. S1P was added to inhibit the formation of fat droplets, while W146 was added to inhibit the formation of fat. The possibility of cell differentiation of ivory bud, inhibition of cell differentiation of fat and possibility of iSCAP were examined in the above studies.