間葉系幹細胞由来ペプチドを利用した炎症抑制と組織再生の両立を実現する治療法の確立

建立利用间充质干细胞衍生肽实现炎症抑制和组织再生的治疗方法

• 批准号: 20K10014
• 负责人: 帖佐 直幸
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K10014/
• 关键词: 間葉系幹細胞; TGF-β; NGF; 組織再生; 炎症; 炎症抑制

間葉系幹細胞（MSC）は組織修復に貢献している。また、神経系の修復や再生にはNGFが局所に作用する。一方、マクロファージ等から分泌されるTGF-β1は免疫応答の制御に重要な役割を果たすとともに、NGFの発現を誘導することが知られている。本年度は炎症および抗炎症性の両者の性質を有するIL-6に着目し、MSCにおけるTGF-β1誘導性NGFの発現、ならびにIL-6が神経修復に与える影響を検討した。ヒト骨髄由来MSC株であるUE7T-13細胞におけるNGFのmRNA発現は、TGF-β1刺激によって濃度・時間依存的に促進された。加えて、TGF-β1刺激はUE7T-13細胞におけるIL-6、FGF-2、TGF-β1のmRNA発現をも促進した。IL-6の発現については、ELISA法によるタンパク質の分泌増強ならびにTGF-β Type1受容体とMEK/ERKの各阻害剤による発現抑制の効果が確認された。さらに、TGF-β1で前処理されたUE7T-13細胞の培養上清にsIL-6Rを添加してPC12細胞を培養した結果、神経突起伸長が顕著に増強された。この増強効果はsIL-6R中和抗体で有意に抑制された。同様にtrans-wellチャンバーを用いたUE7T-13細胞とPC12細胞の非接触型共培養においても、sIL-6R添加によりPC12細胞の神経突起伸長が増強し、sIL-6R中和抗体で抑制された。また、TGF-β1はPC12細胞におけるNGFならびにIL-6の発現に影響を与えなかった。本研究ではTGF-β1がMSCに作用することでNGFとIL-6の両者の発現を誘導することが明らかとなった。MSCより分泌されたNGFは神経分化ならびに神経突起伸長を誘導するとともに、同時に分泌されたIL-6が神経突起伸長を増強することが示された。

Mesenchymal stem cells (MSC) contribute to tissue repair. The repair and regeneration of the nervous system play an important role in NGF. TGF-β1 is an important factor in the regulation of immune response. This year, the nature of inflammatory and anti-inflammatory agents was investigated, including IL-6 expression, TGF-β1-inducible NGF expression in MSCs, and IL-6 effects on neuronal repair. NGF mRNA expression was enhanced by TGF-β1 stimulation in a concentration-time dependent manner in UE7T-13 cells. Stimulation of IL-6, FGF-2 and TGF-β1 in UE7T-13 cells promoted mRNA expression. The inhibition of IL-6 production by ELISA assay was confirmed by the inhibition of IL-6 production by TGF-β receptor and MEK/ERK inhibitors. In addition to sIL-6R, TGF-β1-induced cell culture supernatant of UE7T-13 cells was enhanced in PC12 cells. This increase in potency resulted in intentional inhibition of sIL-6R neutralizing antibodies. In the same way, in the non-contact co-culture of UE7T-13 cells and PC12 cells, sIL-6R was added to increase the neurite elongation of PC12 cells, and sIL-6R neutralizing antibody inhibited it. TGF-β1 and NGF affect the expression of IL-6 in PC12 cells. In this study, the role of TGF-β1 in MSCs was investigated. NGF and IL-6 expression were also investigated. MSC secretes NGF to induce neuronal differentiation and neuronal elongation, and simultaneously secretes IL-6 to induce neuronal elongation.

项目成果

顎関節由来線維芽細胞様滑膜細胞におけるケモカイン発現へのeATPの影響

eATP对颞下颌关节源性成纤维样滑膜细胞趋化因子表达的影响

• 发表时间: 2020
• 作者: 横田聖司; 帖佐直幸; 松本識野; 客本斎子; 加茂政晴; 石崎明
• 通讯作者: 石崎明

マウス顎関節由来線維芽細胞様滑膜細胞における酸化ストレス環境下での炎症反応促進機構について

氧化应激环境下促进小鼠颞下颌关节源性成纤维样滑膜细胞炎症反应的机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 浅沼莞奈;横田聖司;松本識野;吉田弘法;阿部カレン;帖佐直幸;間山寿代;石崎明;佐藤和朗
• 通讯作者: 佐藤和朗

Effects of inflammatory cytokines on osteoblastic differentiation in mesenchymal stem cells

炎症细胞因子对间充质干细胞成骨细胞分化的影响

• DOI: 10.20663/iwateshigakukaishi.45.2_95_13
• 发表时间: 2020
• 期刊: Dental Journal of Iwate Medical University
• 作者: 青木 貴晃;横田 聖司;帖佐 直幸;石崎 明;野田 守
• 通讯作者: 野田 守

酸化ストレスがマウス顎関節由来線維芽細胞様滑膜細胞におけるケモカインの発現に与える影響について

氧化应激对小鼠颞下颌关节成纤维样滑膜细胞趋化因子表达的影响

• 发表时间: 2021
• 作者: 浅沼莞奈 ; 横田聖司 ; 帖佐直幸 ; 松本識野 ; 間山寿代 ; 石崎明 ; 佐藤和朗
• 通讯作者: 佐藤和朗

Adenosine 5′-triphosphate strengthens receptor tyrosine kinase-mediated suppression of fibrogenic activity in fibroblast-like synoviocytes derived from mouse temporomandibular joints possibly through P2Y₂, P2Y₄, and P2Y₁₃

5-三磷酸腺苷可能通过 P2Y₂、P2Y₄ 和 P2Y< 增强受体酪氨酸激酶介导的小鼠颞下颌关节成纤维样滑膜细胞中纤维形成活性的抑制子>子>13</子>

• DOI: 10.20663/iwateshigakukaishi.45.1_46
• 发表时间: 2020
• 期刊: Dental Journal of Iwate Medical University
• 作者: Shikino MATSUMOTO;Seiji YOKOTA;Seiko KYAKUMOTO;Naoyuki CHOSA;Kazuro SATOH
• 通讯作者: Kazuro SATOH