細胞外に存在する分子シャペロンは間葉系幹細胞の増殖や分化を制御する

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平成17年度に、分子シャペロンであるカルレティキュリン(CRT)がin vitroでミエロペルオキシダーゼ(MPO)と結合し、MPOの最大反応速度が増加することを明らかにした。しかしながら基質特異性には影響しないことから、本年度はCRTとMPOの相互作用について、特にCRT存在下におけるMPO特異的阻害剤の影響を解析した。その結果、MPO活性における50%阻害濃度はsalicylhydroxamic acidがCRT存在下・非存在下ともに500μMであったのに対し、4-aminbenzoic hydrazideはCRT存在下で80μM、非存在下では2.5μMであった。このことから阻害様式の違いによってCRT存在下での阻害効果に差が生じることが示された。一方、昨年度にヒト間葉系幹細胞(hMSC)の分化を制御する新たな候補因子としてスクレイピー反応遺伝子1(SCRG1)を同定した。本年度も引き続きSCRG1の性状解析と、hMSCの分化における役割について検討した。その結果、SCRG1はデキサメタゾン処理で負に制御されること、細胞外へ分泌されること、ジスルフィド結合を介してホモダイマーを形成することが明らかになった。さらに、プロテインアレイでSCRG1と結合するタンパクを検索した結果、ラジニン(LAD1)が同定された。LAD1はヘミデスモゾームと基底膜の接着部位でコラーゲン、インテグリン、ラミニン等とコンプレックスを形成することが知られている。この事実はSCRG1が細胞の接着や伸展、増殖等に関与している可能性を示唆している。また、siRNAでhMSCのSCRG1をノックダウン結果、骨分化マーカーであるアルカリホスファターゼの発現が上昇した。このことからSCRG1はhMSCの分化を制御している可能性が示唆された。