Identification for dysbiosis in oral bacterial flora of patients with oral squamous cell carcinoma and development of innovative combination oncoimmune therapy

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本研究では、 口腔扁平上皮癌患者に特徴的な口腔内細菌叢のプロフィールを解析し、口腔内細菌叢の口腔癌発癌・ 進展と口腔粘膜免疫及び腫瘍免疫応答へ及ぼす影響を明らかにし、その分子機序を標的とする口腔扁平上皮癌の予防並びに癌免疫複合療法を増幅させる革新的がん治療薬開発の契機を得る。現在までに、以下の項目の研究を進めている。癌患者検体を用いた口腔内扁平上皮癌の発癌・癌進展に関わる全身・口腔内粘膜免疫・癌特異的免疫に影響を及ぼす口腔内細菌叢プロファイルの解析:各専門家領域(歯周病科、口腔外科、病理診断科、免疫学教室)で協議を行い、健常人及び口腔扁平上皮癌患者の唾液(非刺激)・歯肉縁下プラーク・舌苔・頬粘膜・硬口蓋粘膜、扁平上皮癌病巣の拭い液の採取時期及び場所について協議し、術前一週間前の口腔ケア施行時に、細菌叢サンプルを調製することを決定した。各種細菌叢解析検体より、DNAを抽出し、サンプルが揃い次第、次世代シーケンサー(NGS)にてメタゲノム解析を施行する準備を整えた。扁平上皮癌病巣の癌細胞採取を術中に施行、また、通常の病理標本作製において、近年のゲノム医療に適合する摘出標本の処理、パラフィン包埋切片の作製と遺伝子を抽出し、品質が保証されていることを確認した。患者のリクルートに関して、コロナ禍の影響で予定より大幅に症例登録が遅れている。また、癌組織及び血液検体からの末梢血単核球のストック及び同検体からの純度及び質の高いDNA及びRNAの抽出を確立、末梢血、癌組織より免疫担当細胞を分離し、マルチカラーフローサイトメーターを用いた自然免疫・獲得免疫プロファイルを検討した。保存した末梢血単核球のin vitro内での増殖を確認した。