Analysis of cancer immune response using a virtual lymph node metastasis model

使用虚拟淋巴结转移模型分析癌症免疫反应

• 批准号: 20K10141
• 负责人: 熊丸 渉
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K10141/
• 关键词: 口腔扁平上皮癌細胞株; シングルセル; がんの不均一性・多様性; シングルセル樹立法; 口腔扁平上皮癌細胞; 口腔癌; 癌免疫; 癌免疫応答; 仮想リンパ節転移モデル

がんの不均一性・多様性を解明するうえで、さまざまなタイプのシングルセル由来細胞での解析が重要と考えられる。口腔扁平上皮癌細胞株（WK2）の初代培養より早期に保存された癌細胞よりシングルセル由来の細胞を樹立した。形態学的には、通常の癌細胞の形態をした角化細胞様細胞が大多数を占めていたが、基底細胞様細胞（13-5）と遊走しながらゆっくり分裂する細胞(3-12)を樹立した。角化細胞様細胞8種類と基底細胞様細胞（13-5）および遊走しながらゆっくり分裂する細胞(3-12)について、細胞倍加時間とSphere形成能および遺伝子発現解析（RNA-seq）を行った。結果1)細胞倍加時間とSphere形成能について、8種類の角化細胞様細胞は、2種類（8-16,4-14）以外は分散されていた。13-5と3-12は共に、細胞倍加時間が高く、Sphere形成能が低かった。2）10種類の細胞うち、GFPの導入が可能であった6種類のシングルセル由来細胞をヌードマウス（BALB/cAJcl-nu/nu）の舌に移植したが、腫瘍形成が認められず、再実験が必要である。3)遺伝子発現解析（RNA-seq）について、ヒートマップでは、12-22、（4-14,10-14,9-22,8-16）、（17-13,13-9,20-16）、（3-12,13-5）に大まかに分類され、細胞倍加時間とSphere形成能と比較して、（17-13,13-9,20-16）以外はサブクローンの近い集団であった。現在、特異なサブクローンと考えられる遊走しながらゆっくり分裂する細胞(3-12)についての遺伝子発現を解析中である。

It is important to study the heterogeneity and diversity of cell origin analysis. The primary culture of oral squamous cell carcinoma (WK2) was carried out in vitro. Morphological characteristics of normal cancer cells include keratinized cells, basal cells, and cells (13-5). Keratinized cell type 8 cells and basal cell type (13-5) cells (3 - 12) cells (3 - 13) cells (3-12) cells (3) cells (3-12) cells (3) cells (3) cells (3-12) cells (3) cells) cells (3) cells (3 - 12) cells (3) cells (3) cells) cells (3) cells (3 - 12) Results 1) Cell multiplication time and Sphere formation can be divided into 8 types of keratinocytes and 2 types (8- 16, 4 -14) of keratinocytes. 13-5 3-12 2) It is possible to introduce 10 types of cells and GFP. It is possible to transplant 6 types of Sisengel-derived cells into the tongue of Balb/cAJcl-nu/nu. Tumor formation is recognized and further treatment is necessary. 3)The analysis of gene expression (RNA-seq) is carried out in the following ways: (4-14,10-14,9-22,8-16),(17-13,13-9,20-16),(3-12,13-5),(17 - 13,13-9,20-16), and (17-13,13-9,20-16). Now, the specific cell division (3-12) is in the process of analysis.