創傷の新生血管リモデリングにおける時間遺伝子の働きの解明

本研究の目的は、時間遺伝子が血管新生に果たす役割を明らかにすることである。これは、これまでにない新しい概念であり、独創的な分野である。研究代表者は、過去の研究において、透過型電子顕微鏡により血管内皮の創部へののびだしを観察し、幼弱な内皮細胞と考えられるものが分裂している像を認めた。光顕では創部に新生した血管が、早期では皮膚に直角方向に長く伸び出しており、これが時間とともに健常部同様の血管走行に変化していくことを確認している。これは内皮細胞の形態の一種のリモデリングと考えられ、血管内皮構造のリモデリングという新しい概念があることを示している可能性がある。このような形態変化を捉えることにより、創傷の古さの判定や、治癒過程が正常に進んでいるかを判定することができることが期待される。さらに、研究代表者は、過去の研究において、時間遺伝子のミュータントマウスでは、血管新生因子のmRNAの発現の時間経過がコントロールマウスと異なっていることを明らかにしてきた。そこで、本研究においては、時間遺伝子のミュータントマウスである B6.Cg-Per2tm1Brd Tyrc-Brd/JとそのコントロールマウスであるB6(Cg)-Tyrc-2J/Jについて、皮膚に創を作成し、一定期間後に創の組織を採取し、連続切片について血管内皮マーカーであるＣＤ３１で免疫染色し、３Ｄ画像を構築してきた。3D構築は厚みにおいて立体像に限りがあるため、通常の免疫染色像において新生血管伸び出しの面積を計測した。その結果、時間遺伝子のミュータントマウスでは、コントロールマウスに比べて、新生血管の伸び出しの面積は有意差は見られないことが示された。

本研究の目的は、時間遺伝子が血管新生に果たす役割を明らかにすることである。これは、これまでにない新しい概念であり、独創的な分野である。研究代表者は、過去の研究において、透過型電子顕微鏡により血管内皮の創部へののびだしを観察し、幼弱な内皮細胞と考えられるものが分裂している像を認めた。光顕では創部に新生した血管が、早期では皮膚に直角方向に長く伸び出しており、これが時間とともに健常部同様の血管走行に変化していくことを確認している。これは内皮細胞の形態の一種のリモデリングと考えられ、血管内皮構造のリモデリングという新しい概念があることを示している可能性がある。このような形態変化を捉えることにより、創傷の古さの判定や、治癒過程が正常に進んでいるかを判定することができることが期待される。さらに、研究代表者は、過去の研究において、時間遺伝子のミュータントマウスでは、血管新生因子のmRNAの発現の時間経過がコントロールマウスと異なっていることを明らかにしてきた。そこで、本研究においては、時間遺伝子のミュータントマウスである B6.Cg-Per2tm1Brd Tyrc-Brd/JとそのコントロールマウスであるB6(Cg)-Tyrc-2J/Jについて、皮膚に創を作成し、一定期間後に創の組織を採取し、連続切片について血管内皮マーカーであるＣＤ３１で免疫染色し、３Ｄ画像を構築してきた。3D構築は厚みにおいて立体像に限りがあるため、通常の免疫染色像において新生血管伸び出しの面積を計測した。その結果、時間遺伝子のミュータントマウスでは、コントロールマウスに比べて、新生血管の伸び出しの面積は有意差は見られないことが示された。