特発性TGCV発症におけるATGL遺伝子領域のエピゲノム変化の解析

中性脂肪蓄積心筋血管症(TGCV)は、心筋と冠動脈へトリグリセリドが蓄積する難病であり、adipose triglyceride lipase(ATGL)の著減が主要な原因と考えられている。本研究は、その発症機構を明らかにするためにATGL遺伝子に欠損を持たない特発性TGCVにおいてATGL遺伝子が受けるエピジェネティックな抑制を調べることを目的としていた。その根底として特発性TGCVでもATGL発現が減少しているという仮説があったが、その後、特発性TGCVではATGL発現量に変化がなく酵素活性が減少していることが判明し方針変更となった。そこで特発性TGCVの発症に関わる新たなエピジェネティック研究のための検討を行った。（1）対象としてラット心筋細胞H9C2を候補とし脂質代謝の可視化の検討を行った。心臓検査に用いられている放射性標識した長鎖脂肪酸I123-BMIPPを蛍光標識に改変した蛍光BMPPを作製し、蛍光BMPPが細胞内に取り込まれ、その後、排出が起こることを確認した。同様にヒトHeLa細胞において蛍光BMPPが細胞内で代謝を受け、その取り込みが長鎖脂肪酸受容体であるCD36の阻害剤SSOに阻害されることを確認した。（2）特発性TGCVの発症に関わるエピジェネティック制御研究対象としてPNPLA3を候補とした。PNPLA3はATGLと同様のリパーゼファミリーに属し脂肪肝との関連が知られているが、心疾患との関連は報告されていない。そこで特発性TGCV患者検体を肝障害の有無に分け、ゲノムDNAについてPNPLA3遺伝子の変異解析を行った。肝障害検体に特異的な新たなPNPLA3遺伝子の変異は見られなかったが、欧米で非アルコール性脂肪性肝疾患との強い相関が知られるSNP_I148Mはすべての検体において見られた。

中性脂肪蓄積心筋血管症(TGCV)は、心筋と冠動脈へトリグリセリドが蓄積する難病であり、adipose triglyceride lipase(ATGL)の著減が主要な原因と考えられている。本研究は、その発症機構を明らかにするためにATGL遺伝子に欠損を持たない特発性TGCVにおいてATGL遺伝子が受けるエピジェネティックな抑制を調べることを目的としていた。その根底として特発性TGCVでもATGL発現が減少しているという仮説があったが、その後、特発性TGCVではATGL発現量に変化がなく酵素活性が減少していることが判明し方針変更となった。そこで特発性TGCVの発症に関わる新たなエピジェネティック研究のための検討を行った。（1）対象としてラット心筋細胞H9C2を候補とし脂質代謝の可視化の検討を行った。心臓検査に用いられている放射性標識した長鎖脂肪酸I123-BMIPPを蛍光標識に改変した蛍光BMPPを作製し、蛍光BMPPが細胞内に取り込まれ、その後、排出が起こることを確認した。同様にヒトHeLa細胞において蛍光BMPPが細胞内で代謝を受け、その取り込みが長鎖脂肪酸受容体であるCD36の阻害剤SSOに阻害されることを確認した。（2）特発性TGCVの発症に関わるエピジェネティック制御研究対象としてPNPLA3を候補とした。PNPLA3はATGLと同様のリパーゼファミリーに属し脂肪肝との関連が知られているが、心疾患との関連は報告されていない。そこで特発性TGCV患者検体を肝障害の有無に分け、ゲノムDNAについてPNPLA3遺伝子の変異解析を行った。肝障害検体に特異的な新たなPNPLA3遺伝子の変異は見られなかったが、欧米で非アルコール性脂肪性肝疾患との強い相関が知られるSNP_I148Mはすべての検体において見られた。