胎生臓器ニッチ法による腎臓再生に最適なヒトiPS細胞由来ネフロン前駆細胞の探索

使用胚胎器官生态位方法寻找最适合肾脏再生的人 iPS 细胞衍生的肾单位祖细胞

• 批准号: 20K17296
• 负责人: 田尻 進
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K17296/
• 关键词: 多能性幹細胞; ネフロン前駆細胞; iPS細胞; 腎臓再生; ソーティング; 慢性腎不全; 移植

本研究は、①最適な分化誘導法の検証、②Sorting法の開発、③移植時の細胞調節法、④打ち込む細胞の安全性の確認、⑤移植後の評価といった項目でなりたっ ている。下記に項目ごとの進捗状況を簡単に記載する。①多能性幹細胞（iPSCs）からネフロン前駆細胞（NPCs）への最適な誘導法の検証；iPSCsからNPCsへの誘導法として、Taguchiら、Morizaneら、Takasatoらが用 いた方法を検証した。このうち、効率よくNPCsへの分化誘導可能であったTaguchi,Morizaneらの方法に絞って検証を行った。昨年の検証において、NPCsの誘導は Taguchiらの方法を用いて行うことにした。 ② NPCsの適切なsorting法に関して；従来のセルソーターを用いたSortingは、時間がかかるうえに、細胞に与えるダメージも大きい。申請者らは磁石つき抗体 を目的細胞に付着させ、磁石を用いた簡便なSortingで、短時間で効率よくNPCsを純化することに成功した ③ 移植時の細胞調製；移植の際、細胞をガラス管を用いて、胎仔後腎へ投与することが必要になる。移植は、手技的に難易度がたかく、マウス胎仔後腎の個数 も限られているので、ヒトiPS由来NPCとマウスの後腎に含まれる細胞が後腎内で相互に影響し合い、ヒトとマウスの細胞からなるキメラ腎臓が再生できるのか検証するには、不向きである。そこで申請者は、in vitroで簡便に検証できる実験系の立ち上げをおこなった。具体的には、マウス後腎をバラバラにし、そこにヒ トiPSC由来NPCを混ぜ、遠心し、凝集させることで、マウス後腎細胞とヒトiPSC由来NPCからなるキメラ腎臓を作成、よりキメラ率があがる条件の検討を行った。この成果は現在論文投稿中である。④⑤に関しては今後の推進方策で述べる

In this study, 1 the most effective differentiation strategy, the 2Sorting method, 3 the cell culture assay at the time of transplantation, 4 the confirmation of the safety of the cell after transplantation, and 5 the safety assurance of the cell after transplantation. The progress of the following items will be recorded. 1. Multipotent cell (iPSCs), NPCs cell (NPCs), NPCs cell (Taguchi), Morizane cell (Takasatoshi), Takasatoshi cell (Takasatoshi). The rate of NPCs differentiation may be different from the Taguchi,Morizane method. Last year, NPCs instructed the Taguchi to use this method to improve the performance of the company. 2. NPCs cut the sorting method to make sure that you can use the Sorting, the time limit, the cell and the phone. The applicant said that the magnet antibody was used for the purpose of monitoring, the magnet was used for stool Sorting, and the short-term response rate was NPCs for successful transplantation. when the transplant was successful, it was necessary for the transplant to be used, the baby to be injected and the baby to be injected. There is a limit on the number of babies after transplantation, the number of babies born, the number of babies, the number of babies born, the number of babies If you want to apply for help, in vitro will tell you that you need to pay attention. Specific information about the origin of iPSC, such as the origin of NPC, heart, agglutination, agglutination, iPSC, NPC, temperature, etc. The results are now being submitted in the article. 45 years later, we will promote strategies and policies.