胎児期～新生児早期からの腸管免疫寛容誘導により壊死性腸炎治療の可能性を探る

探讨诱导胎儿期至新生儿早期肠道免疫耐受治疗坏死性小肠结肠炎的可能性

• 批准号: 20K17574
• 负责人: 山木 聡史
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K17574/
• 关键词: 壊死性腸炎; 腸管免疫; 低い出生体重児; 新生児; 免疫寛容; 低出生体重児

壊死性腸炎（NEC）は腸管免疫の未熟性を背景とし過剰免疫応答により発症するとされており、特にToll-like receptor(TLR4)に関連した過剰免疫応答が注目されている。また、胎児性Fc受容体(FcRn)は腸管に発現し、腸管免疫制御に重要な役割を果たすことが知られている。そこで、我々は、ヒト組織における、TLR4、FcRnの発現状況を検証することとした。宮城県立こども病院において、NECおよび関連する病態である特発性/限局性腸管穿孔(FIP/LIP)、胎便関連性腸閉塞症（MRI）により手術を施行した症例の手術検体のパラフィンブロックや手術時の臨床情報を収集した。また、上記症例のうち人工肛門造設/閉鎖術を施行した症例では、人工肛門閉鎖時の腸管切除検体のパラフィンブロックと手術時の臨床情報も収取した。TLR４,FcRnの免疫染色用の抗体を購入し、条件検討を行い現在、上記症例のパラフィンブロックを薄切し、免疫染色を施行中である。免疫染色後には、染色したスライドをAperio AT2(Leica microsystems, Japasn)を用いて、デジタル変換を行い、画像解析ソフト(Halo imaging analysis software; Indica Labs, New Mexico,USA)を用いて解析予定である。特に、本研究では、TLR4,FcRnの腸管上皮における発現を測定する予定である。疾患ごとの違いや初回手術時から人工肛門閉鎖術時での腸管免疫の状態の経時的変化を測定する予定である。また、コントロールとして正常腸管は剖検例の腸管を使用することで、正常腸管とNEC、FIPP/LIP、MRIを比較することでヒト組織における腸管免疫の未熟性を検討し、NECなどの病因との関連と発症機序を解明したいと考えている。

坏死性肠炎（NEC）据说是由于肠道免疫的不成熟而引起的过免疫反应引起的，并且与Toll样受体（TLR4）相关的超免疫反应尤其引起了人们的关注。此外，胎儿FC受体（FCRN）在肠道中表达，已知在肠道免疫调节中起重要作用。因此，我们决定验证人体组织中TLR4和FCRN的表达状态。手术时的石蜡块和临床信息是从接受NEC手术的手术标本中收集的，这些病例与NEC进行了手术及其相关病理，例如特发性/局部肠道穿孔（FIP/LIP）和Meyagi Cedium相关的肠道梗阻（MRI）在Miyagi前后儿童医院。此外，在上述情况下，如果进行结肠造口术/关闭，则收集结肠造口术时肠切除标本的石蜡块，并在手术时进行临床信息。购买了针对TLR4和FCRN免疫染色的抗体，检查了条件，并目前正在切片和免疫染色。免疫染色后，将使用Aperio AT2（Leica Microsystems，Japasn）进行数字转换，并使用图像分析软件（Halo Imaging Analysis软件； New Mexico，New Mexico，USA）进行分析。特别是，这项研究将测量肠上皮中TLR4和FCRN的表达。我们计划衡量肠道免疫状态从初始手术到结肠造口术时期的疾病和随着时间的变化的差异。此外，通过将尸检病例中的肠道作为对照，我们想通过将正常肠道与NEC，FIPP/LIP和MRI进行比较，并阐明NEC的病原体与其他病原体的病原体与发作机构的机制和机制之间的关系，来研究人体组织中肠道免疫的不成熟。