Extracellular vesicle-based Immunomodulation for NSCLC therapy

基于细胞外囊泡的免疫调节治疗非小细胞肺癌

• 批准号: 20K17766
• 负责人: 小山 昂志
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Miyagi Prefectural Hospital Organization Miyagi Cancer Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K17766/
• 关键词: 細胞外小胞; ドラッグデリバリーシステム; 樹状細胞; 非小細胞肺癌

本研究では、より効果的な免疫治療を目指し、エクソソームを利用した新たなドラッグデリバリーシステムの開発を目指した。樹状細胞は免疫系の司令塔として感染免疫や抗腫瘍免疫に必須の役割を担う。一方、エクソソームは細胞間コミュニケーションに多彩な役割を果たす細胞外小胞である。 エクソソーム分泌にはESCRTなどが働くが、取り込み機構には不明な点が多い。DDSを利用した抗腫瘍免疫活性化における技術革新を図るには、樹状細胞をより効果的に活性化し、CD8 T細胞に対して癌関連抗原の提示を能率的に行うことが重要となる。そこで、樹状細胞へのエクソソームによる抗原送達法の確立を行った。これまでに、受容体型チロシンキナーゼの一つであるTYRO3を発現したマウス樹状細胞株DC2.4（DC2.4/TYRO3）では、細胞内に取り込まれたエクソソームが増加することを見出している。本年度は、DC2.4/TYRO3は、エクソソームによって送達された抗原をCD8 T細胞に対し効率的に抗原提示することが可能かどうか検証した。DC2.4/TYRO3による抗原提示能は、モデル抗原であるOVA（オボアルブミン全長）を含む エクソソームを添加しLPSで活性化したのちに、OT-Iマウス（Ova抗原特異的TCRトランスジェニックマウス）由来CD8+T細胞と共培養し、細胞分裂をフローサイトメーターにて調べた。その結果、DC2.4/TYRO3は37℃でエクソソームが運搬する抗原の提示能も高いことが示された。次年度は、TYRO3ノックアウトマウスを用いたin vivo、ex vivoの実験にてエクソソームの細胞内への取り込みや抗原送達を検証する。

This research provides insight into effective immunotherapy and the development of a new diagnostic system that utilizes the ECK solution. Dendritic cells are responsible for the immune system, infection immunity and tumor immunity. A party, a party Escrt is the most important factor in the secretion of DDS is used to activate anti-tumor immune system. It is important to activate dendritic cells and CD8 T cells. The establishment of antigen delivery method in tree-like cells The cell line DC2.4 (DC2.4/TYRO3) was developed in a receptor-type cell line. This year, DC2.4/TYRO3 is ready to deliver antigen to CD8 T cells. DC2.4/TYRO3 antigen can be used to detect the presence of OVA antigen, including OVA antigen, LPS activation, OT-I antigen (Ova antigen specific TCR antigen), CD8 +T cells and co-culture, cell division, and cell division. As a result, DC2.4/TYRO3 was able to display the antigen at 37℃. In the next year, TYRO3 was used in vivo, ex vivo and in vivo to detect the presence of antigens in the cells.

项目成果

Tyro3-Gas6およびTyro3-Protein S複合体は、リン脂質結合によりCD63陽性エクソソームを細胞内に取り込む

Tyro3-Gas6 和 Tyro3-Protein S 复合物通过磷脂结合将 CD63 阳性外泌体导入细胞

• 发表时间: 2022
• 作者: 小山 昂志;小嶋 克彦; 前田 昂樹;竹下 敏一;森田 英嗣 ;田中 伸幸
• 通讯作者: 田中 伸幸

樹状細胞におけるエクソソーム取り込み機構の解析とワクチン抗原送達法への展開

树突状细胞外泌体摄取机制分析及疫苗抗原递送方法开发

• 发表时间: 2021
• 作者: Hashimoto K;Omura K;Iwamoto N;Ichinose J;Matsuura Y;Nakao M;Mun M;小山昂志
• 通讯作者: 小山昂志

TYRO3 mediates antigen cross-presentation by dendritic cells

TYRO3 介导树突状细胞的抗原交叉呈递

• 发表时间: 2021
• 作者: Akira Hamada;Kenichi Suda;Shota Fukuda;Masaya Nishino;Shuta Ohara;Masato Chiba;Masaki Shimoji;Toshiki Takemoto;Junichi Soh;Yasuhiro Tsutani;Tetsuya Mitsudomi;小山昂志
• 通讯作者: 小山昂志

TYRO3 は GAS6 を介してフォスファチジルセリンに結合することでエクソソームを取り込む

TYRO3 通过 GAS6 与磷脂酰丝氨酸结合来内化外泌体

• 发表时间: 2022
• 作者: 小山 昂志、小嶋 克彦;前田 昂樹、竹下 敏一、森田 英嗣、田中 伸幸
• 通讯作者: 前田 昂樹、竹下 敏一、森田 英嗣、田中 伸幸