質量分析器を利用した神経膠腫の術中迅速細胞密度測定
使用质谱仪快速测量神经胶质瘤的术中细胞密度
基本信息
- 批准号:20K17925
- 负责人:
- 金额:$ 2.5万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
- 财政年份:2020
- 资助国家:日本
- 起止时间:2020-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究の目的は新たな境界指標として、迅速かつ簡便に腫瘍の細胞密度を測定できる手術支援装置の開発であり、装置として質量分析器を用いる。本研究では期間内に、1)培養細胞での腫瘍細胞密度測定、2)マウスモデルを用いた診断精度の検証、3)ヒト凍結検体を用いた診断精度の検証、を実現する予定で研究を開始した。令和2年度は1)培養細胞実験:グリオーマ細胞株を安定し継代し、マススペクトル診断の精度検証および2)マウスモデルの作成と試料作成をおこなった。マウスモデルはマウス グリオーマ細胞株GL261を右大脳に定位移植した頭蓋内移植モデルを作成し、正常コントロール(PBS移植)と移植群各n=8で作成した。マウス大脳を凍結保存すると並行して、マウス尾より血液採取 (移植前、移植後3,7,14,21日) -80℃で保存した。令和3年度は3)ヒト凍結検体を用いた診断精度の検証:ヒト検体については凍結標本から、18の試料を作成した。細胞密度に関しては、細胞株のような均質な検体の場合は、有効だが、ヒト組織のような腫瘍だけでなく血管などが入り込むと複雑化し、正確性に欠けることが分かったため、質量分析器の特性を活かしたグリオーマのバイオマーカー探索も並行して行うこととした。令和4年度はマウスモデルの尿検体と血液検体のマススペクトルデータ解析を行い、移植後早期から有意に変化するマススペクトルを発見した。各マススペクトルに対してHuman Metabolome Databaseで代謝産物候補を絞り、病的意義を検討した。
The purpose of this study is to develop a new, rapid and simple method for measuring tumor cell density, and to develop a quality analyzer for surgical support devices. This study began with 1) tumor cell density measurement using cultured cells, 2) diagnostic accuracy evaluation using frozen cells, and 3) diagnostic accuracy evaluation using frozen cells. 1) Cell culture: cell line stability, cell quality, diagnostic accuracy, 2) Cell quality, sample preparation The cell line GL261 was transplanted into the brain in the right position, and the normal cell line (PBS transplantation) and the transplanted population were each prepared with n=8. Blood samples were collected (before transplantation, 3, 7, 14, 21 days after transplantation) at-80℃. 3) Test for diagnostic accuracy of frozen samples: Test for frozen samples, 18 test samples Cell density, cell strain, tissue, blood vessel, mass analyzer, quality analyzer In 2004, the analysis of urine and blood samples was carried out, and the early stage after transplantation was intentionally changed. The significance of each metabolite candidate in the Human Metabolism Database is discussed.
项目成果
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