血管新生能を有する骨髄間葉系前駆細胞を用いた血管新生療法の開発

利用具有血管生成潜力的骨髓间充质祖细胞开发血管生成疗法

• 批准号: 20K18450
• 负责人: 荻野 晶弘
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Toho University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18450/
• 关键词: Fibrocyte; bFGF; 血管新生; 組織修復; 三次元培養; CXCL12; CXCR4; in vitro study

我々の研究では，好塩基性線維芽細胞増殖因子(basic fibroblast growth factor: bFGF)を投与したラット皮膚創部ではCD34とProcollagen1を共発現するFibrocyteが同定された。このCD34+/Procollagen1+ fibrocyte (CPF)は管腔構造を形成するので新生毛細血管の形成に関与すると考えられた。よってbFGF投与創部ではCPF発現誘導による血管新生メカニズムが示唆された。本研究ではbFGF誘導性のCPFによる血管新生能を検証するため，bFGF投与による肉芽組織をコラーゲンゲルに移植しFibrocyteの発現性や血管新生能についてin vitro培養系で検討した。また，近年FibrocyteのマーカーであるCXCL12/CXCR4ケモカインの関与についても検討した。手法としてはSDラット背部皮膚に全層性潰瘍を作成し， bFGF投与後に肉芽組織細胞を抽出し，コラーゲンゲル培地にて三次元回旋培養を行った。その結果、コラーゲンゲル内に増殖したFibrocyteは，bFGF投与群ではコントロール群に比して有意な管腔様構造が形成された。この過程でbFGF投与群においてCD34の有意な発現増加がRT-PCR解析から確認された。このことはbFGFによるCD34+ fibrocyte発現誘導による血管形成メカニズムを示唆した。Fibrocyteに発現するCXCR4はCXCR4のligandであるCXCL12の刺激によりFibrocyteの集簇に関与することが示唆されている。そこでbFGF投与による肉芽組織における血管新生性CPFの誘導におけるCXCL12/CXCR4の関与を検討した。CXCL12/CXCR4の発現性も検討するとbFGF投与群でのCXCL12/CXCR4の有意に増加が確認された。そこでbFGF投与肉芽組織にCXCL12 アンタゴニストであるAMD3100を投与したところ投与群では非投与群に比べてCFPの有意な減少が確認された。よってbFGFによるCD34+ fibrocyte発現誘導による血管形成メカニズムにCXCL12/CXCR4の関与が強く示唆された。

In our study, we found that basic fibroblast growth factor (bFGF) co-expressed CD34 and Procollagen1 in skin wounds and fibroblasts co-regulated. CD34 +/Procollagen1+ fibrocyte (CPF) is related to the formation of new capillaries due to the formation of lumen structure. The administration of bFGF to the wound induced angiogenesis. In this study, we investigated the induction of angiogenesis by bFGF in vitro culture systems. CXCL12/CXCR4 is the most important part of Fibrocyte. The method is used to prepare the full-thickness ulcer of the back skin. After bFGF is administered, the granulation tissue cells are extracted and cultured in three dimensional rotation. As a result, the growth of fibrocytes in the cells was enhanced by bFGF administration, which resulted in the formation of an intentional lumen structure. This process resulted in the intentional increase of CD34 in bFGF administration and group identification by RT-PCR analysis. The expression of CD34 + fibrocyte was induced by bFGF. CXCR4 and CXCR4 ligand CXCL12 stimulate the development of fibrocytes. The relationship between bFGF and angiogenesis induced by granulation tissue and CXCL12/CXCR4 was discussed. CXCL12/CXCR4 was intentionally added to the bFGF administration group for identification of the presence of CXCL12/CXCR4 CXCL12 was found to have decreased significantly in the presence of bFGF in granulation tissue, compared with the presence of AMD3100. The relationship between CXCL12/CXCR4 and angiogenesis in the induction of CD34 + fibroblast development by bFGF has been demonstrated.

项目成果

bFGFによる骨髄間葉系前駆細胞(Fibrocyte)の誘導とCXCL12/CXCR4の発現増加

bFGF 诱导骨髓间充质祖细胞（纤维细胞）并增加 CXCL12/CXCR4 的表达

• 发表时间: 2021
• 作者: 西村礼司;松浦愼太郎;前田和洋;岡根谷哲哉，藤澤千恵，青木茂久，荻野晶弘，三上哲夫，林明照，赤坂喜清
• 通讯作者: 岡根谷哲哉，藤澤千恵，青木茂久，荻野晶弘，三上哲夫，林明照，赤坂喜清

bFGFによる骨髄間葉系前駆細胞(Fibrocyte)の血管新生能の解析

使用 bFGF 分析骨髓间充质祖细胞（纤维细胞）的血管生成能力

• 发表时间: 2021
• 作者: Mana Hasegawa;Masanori Otake;Rantaro Kamimura;Isao Saito;Noritaka Fujii;Kensuke Yamamura;Keiichiro Okamoto;岡根谷哲哉，荻野晶弘， 赤坂喜清
• 通讯作者: 岡根谷哲哉，荻野晶弘， 赤坂喜清

bFGFによる骨髄間葉系前駆細胞(Fibrocyte)の誘導とCXCL12/CXCR4シグナル増加

bFGF 诱导骨髓间充质祖细胞（纤维细胞）并增加 CXCL12/CXCR4 信号

• 发表时间: 2020
• 作者: Osaki Ayana;Sanematsu Keisuke;Yamazoe Junichi;Hirose Fumie;Watanabe Yu;Kawabata Yuko;Oike Asami;Hirayama Ayaka;Yamada Yu;Iwata Shusuke;Takai Shingo;Wada Naohisa;Shigemura Noriatsu;岡根谷哲哉，藤澤千恵，青木茂久， 荻野晶弘， 岡田恵美， 三上哲夫，林明照，赤坂喜清
• 通讯作者: 岡根谷哲哉，藤澤千恵，青木茂久， 荻野晶弘， 岡田恵美， 三上哲夫，林明照，赤坂喜清

bFGF による骨髄間葉系前駆細胞(Fibrocyte) の誘導とケモカインの発現増加

bFGF 诱导骨髓间充质祖细胞（纤维细胞）并增加趋化因子的表达

• 发表时间: 2020
• 作者: 岡根谷哲哉;藤澤 千恵;青木 茂久; 荻野 晶弘;岡田 恵美;三上 哲夫; 林 明照;赤坂 喜清
• 通讯作者: 赤坂 喜清