抗炎症性マクロファージと間葉系幹細胞を併用した歯周病関連アテローム硬化症治療戦略

利用抗炎巨噬细胞和间充质干细胞联合治疗牙周病相关动脉粥样硬化的策略

• 批准号: 20K18514
• 负责人: 滝沢 尚希
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18514/
• 关键词: m2マクロファージ; MSC; M2-MΦ; M2マクロファージ; 間葉系幹細胞; 抗炎症性マクロファージ

我々はこれまでに、マウス骨髄をある条件下で培養するとMSCとM2-Mφが同時に増殖・培養されること、またこの培養系ではM2-Mφ前駆細胞の増殖促進とM2化の誘導にはMSC由来のM-CSFやMSCの接着因子が関わっていることを明らかにした。一方、マウス末梢血を採取し、M2-MΦ前駆細胞を増殖させるM-CSFを加え通法(37°C, 5% CO2)で長期培養したところ、M2-MΦが誘導されることを見出した。そこで本研究ではまず初めに、末梢血由来血球系細胞を用いたM2-MΦの大量培養法を確立するために、様々な条件下でMSCを用いる培養と比較検討した。令和3年度は、末梢血とMSCの接着共培養系、トランスウェルによる末梢血とMSCの非接着共培養系、末梢血にM-CSFのみを添加した培養系の3条件を設定し、M2-MΦ分化・増殖能を比較検討した。その結果、末梢血にM-CSFを単独作用する条件下で、その他の培養系とほぼ同等のM2-MΦ分化・増殖能を示した。また、M2-MφのM2極性維持機構については、現在、NIH-3T3細胞（対照）とMSCそれぞれの細胞とM2-Mφとの共培養での評価のための培養条件の検討を行なっている。令和4年度には、末梢血にM-CSFを作用し生成したM2-MΦを、継続してM-CSF存在下で単独培養、MSCとの接着共培養、NIH3T3細胞との接着共培養を行いマーカー発現を比較検討した。その結果、M-CSF単独培養とMSC接着共培養系では同程度のCD206発現を示したが、NIH3T3共培養系ではCD206発現は有意に減少した。このことは、MSCが炎症部位でM2-MΦのニッチとなり抗炎症機能を長期に維持することを示唆した。このMSCに特異的なMΦのM2維持機能を利用したMSC細胞治療法は、歯周病菌により増悪が予想されるアテローム硬化の進行を抑制する新たな細胞治療開発の一助となると考えられる。

In this paper, we study the effect of MSC on the growth of M2 cells in the same time. In the same time, we need to know the origin of M-CSF MSC and the factors that influence the growth of M2 cells. On the one hand, the peripheral blood was collected from the peripheral blood, and the cells of M2murM Φ were cultured for a long time by adding the M-CSF method (37 °C, 5% CO2), and the M2MuM was used to guide the production of the drug. In this study, in the early days of this study, the cells of peripheral blood origin were confirmed by the method of mass culture, and that of MSC was compared with that of peripheral blood in this study. Ling and 3 years old, peripheral blood MSC was then co-cultured, peripheral blood MSC was not co-cultured, M-CSF was added to peripheral blood culture, 3 conditions were set, and M2MuM Φ differentiation culture was compared. The results showed that the differentiation ability of M2murM Φ was the same as that of M2murM Φ under the condition of peripheral blood M-CSF alone. Now, NIH-3T3 cell (photo), MSC cell (photo), MSC cell (M2), M2 cell (M2), M2mura, M2, M2 Ling and 4 years ago, the effect of M-CSF in peripheral blood produced the production of M2murine, the presence of M-CSF, the co-culture of MSC, and the co-culture of NIH3T3 cells. The results showed that M-CSF alone cultured MSC and then co-cultured the same degree of CD206 and NIH3T3 co-cultured CD206 showed that there was an intentional decrease. The anti-inflammatory mechanism can be maintained for a long time to show that the anti-inflammatory mechanism can be maintained for a long time in the inflammatory site of MSC. The special MSC M2 maintenance machine is able to use the cell therapy method of MSC and the detection of bacterial pathogens that you want to treat severe sclerosis to inhibit the new cell therapy.

项目成果

マウス末梢血から抗炎症性マクロファージを効率的に調製する条件の検討 新たな細胞治療の樹立の試み

研究从小鼠外周血中有效制备抗炎巨噬细胞的条件尝试建立新的细胞疗法

• 发表时间: 2022
• 期刊: 岩手医科大学歯学雑誌
• 作者: 滝沢 尚希;客本 齊子;加茂 政晴;帖佐 直幸;鈴木 啓太;中里 茉那美;佐々木 大輔;石崎 明;八重柏 隆
• 通讯作者: 八重柏 隆

細胞治療応用を目的としたマウス末梢血から抗炎症性マクロファージを効率的に調製する条件の検討

检查从小鼠外周血中有效制备抗炎巨噬细胞用于细胞治疗应用的条件

• 发表时间: 2021
• 作者: 滝沢 尚希;鈴木 啓太;村井 治;佐々木 大輔;客本 齊子;石崎 明;八重柏 隆
• 通讯作者: 八重柏 隆

歯周治療応用を目的とした末梢血からの抗炎症性マクロファージの効率的な大量調整法の検討

外周血抗炎巨噬细胞有效质量调节方法在牙周治疗中的应用研究

• 发表时间: 2020
• 作者: 滝沢 尚希;鈴木 啓太;村井 治;佐々木 大輔;客本 齊子;石崎 明;八重柏 隆
• 通讯作者: 八重柏 隆