生体内での顎関節症滑膜炎誘導機構の解明

体内颞下颌关节滑膜炎诱发机制的阐明

• 批准号: 20K18690
• 负责人: 小林 一彦
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18690/
• 关键词: エラスチン; 顎関節

in vivo でのエラスチン断片による顎関節での IL-6 の産生誘導と顎関節 OA 様変化の 観察:日本白色家兎の顎関節腔にエラスチン断片を注入して滑液を回収する。滑液中の IL-6 濃度を ELISA 法にて測定し、エラスチン断片による顎関節での IL-6 の産生誘導を確認する。 さらに、顎関節のパラフィン切片を作製し、IL-6 の発現と局在を免疫組織学的に検討する。症自然発症マウスを用いた顎関節症の検証:関節症自然発症マウスの Str/Ort マ ウスの顎関節部をマイクロ CT を用いて観察し、骨の OA 様病変を観察する。さらに顎関節滑 液を関節腔洗浄により採取し、ELISA 法にてエラスチン断片および IL-6 濃度を測定する。ま た、顎関節のパラフィン切片を作製し、エラスチンの断裂の程度や IL-6 の局在を免疫組織学 的に観察する。、靭帯組織で IL-6 を発現する遺伝子改変マウスでの顎関節病変の観察:エラスチン は顎関節の腱や靭帯組織に多く発現している。靭帯特異的に発現するテノモジュリン遺伝子 のプロモーターと、腱特異的に発現するスクレラキス遺伝子のプロモーターを用いて、靭帯 または腱特異的に IL-6 を発現する遺伝子改変マウスを作製する。この遺伝子改変マウスの顎 関節をマイクロ CT にて解析し、顎関節の OA 様変化を解析する。さらに、顎関節のパラフィ ン切片を作製し、骨や軟骨の破壊および滑膜炎の程度を観察し顎関節症が誘導されているか を観察する。

弹性蛋白片段在体内诱导IL-6的产生，并观察到颞下颌关节中的OA样变化：弹性蛋白片段被注入日本白兔子的颞下颌关节空间中，以收集滑液。通过ELISA测量滑液中IL-6的浓度，以证实弹性蛋白片段在颞下颌关节中诱导IL-6的产生。此外，制备了颞下颌关节的石蜡切片，并通过免疫组织化学检查IL-6的表达和定位。使用自发发育的小鼠对颞下颌关节疾病的验证：使用Microct观察到自发发育的小鼠的颞下颌关节，以观察骨骼中的OA样病变。另外，通过灌溉关节腔收集颞下颌关节光滑流体，并使用ELISA方法测量弹性蛋白片段和IL-6的浓度。此外，制备了颞下颌关节的石蜡切片，并对弹性蛋白破裂程度和IL-6定位的免疫组织化学观察结果。在韧带组织中表达IL-6的转基因小鼠中的颞下颌关节病变观察：弹性蛋白在颞下颌关节的肌腱和韧带组织中高度表达。使用Tenomodulin基因的启动子（在韧带中特别表达）和Sucrelakis Gene的启动子（在肌腱中特别表达）产生了在韧带或肌腱中特别表达IL-6的遗传修饰的小鼠。通过Microct分析了该转基因小鼠的下巴关节，以分析下巴关节中的OA样变化。此外，还制作了颞下颌关节的石蜡切片，观察到骨骼和软骨破坏和滑膜炎的程度是确定是否诱导了颞下颌关节疾病。