Establishment of clot biopsy aiming at development of a simple method for early detection of COPD

建立凝块活检，旨在开发一种早期检测慢性阻塞性肺病的简单方法

• 批准号: 20K21738
• 负责人: 吉田 安宏
• 金额: $ 3.99万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-07-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K21738/
• 关键词: クロットバイオプシー; COPD; 血餅; サイトカイン; PM2.5

これまでに、血餅を冷凍した冷凍血餅と、即時調整した試料を比較しても、冷凍による解析に与える影響がないことがわかっている。また血餅を血餅溶解液と混合し、血餅に含まれている血液由来成分を抽出して種々のタンパク質を解析することを観察していた。本年度は実際に肺の炎症を起こさせた状態で、これらの解析ができるかを検討した。肺の炎症モデルとして、始めに抗がん剤であるブレオマイシン誘導想起肺炎症モデルを用いた。ブレオマイシンは長期投与で肺の線維化が起きるが、その前の炎症初期段階（投与後3日目）で解剖し、肺胞洗浄液と血餅溶解液、二次リンパ組織である脾臓から脾臓細胞を調製した。ブレオマイシン投与後3日目の肺胞洗浄液中には、炎症性サイトカインであるIL-6やケモカインであるMCP-1が検出され、炎症モデルとして成立していることを確認した。興味深いことに脾臓細胞のConA反応性も亢進しており、これは新たな免疫学的研究の争点となるかもしれないと考えられた。この炎症モデルから得られた血餅（クロット）では、炎症時に活性化される転写因子NF-κBのリン酸化が、対照群と比べ亢進していることがウエスタンブロット法により確認された。また、NF-κBの転写活性（DNA結合能）を検討するため血餅溶解液を用いてゲルシフトアッセイを行ったところ、確かにブレオマイシン処理群でNF-κBのDNA結合能が亢進していることも観察された。このことは、血餅溶解液は転写因子の活性を保持したまま、保存できていることを示唆しているものと考えられる。2つ目の炎症もでるとして、タバコ抽出物を気管内投与するCOPDのモデルマウスを作成した。ブレオマイシン処理マウスと同様に、血餅（クロット）中のNF-κBなどは検出できており、詳細な分子の挙動を精査・検討中である。以上から、クロットバイオプシー法の広範囲に及ぶ有用性が示唆された。

The frozen blood cake was frozen and the sample was adjusted in real time. The frozen blood cake was analyzed and the sample was analyzed. The blood cake lysates are mixed, and the blood-derived components are extracted and analyzed. This year, the status of lung inflammation has been discussed. Inflammation of the lungs is caused by inflammation of the lungs. After long-term administration, the lung's linear maintenance was initiated and the initial stage of inflammation (3 days after administration) was dissected, lung lavage fluid, blood cake lysate, and secondary tissue preparation. 3 days after the administration, inflammatory cytokines were detected in the lung lavage fluid. The research of spleen cells and their anti-inflammatory properties is very interesting. The inflammation of the liver is caused by the activation of NF-κB and the activation of NF-κB. The activity of NF-κ B (DNA binding energy) was investigated in the presence of a serum lysate. The activity of the blood cake dissolving solution is maintained and preserved. 2. The inflammation of the eye is caused by the injection of the extract into the tube. NF-kB in the blood cake is detected in the same way as in the blood cake, and the detailed molecular movement is examined in detail. The above is a summary of the scope and usefulness of the method.

项目成果

ClotBiopsy:New methods for lung inflammation

凝血活检：肺部炎症的新方法

• 发表时间: 2022
• 作者: Yasuhiro Yoshida;Duo WANG;Zirui ZENG;Mengyue SHEN
• 通讯作者: Mengyue SHEN

粒子状物質の生体影響を測定するレポーター細胞の開発

开发报告细胞来测量颗粒物的生物效应

• 发表时间: 2021
• 作者: Duo Wang;Yasuhiro Yoshida
• 通讯作者: Yasuhiro Yoshida

新規炎症マーカー探索手法としてのクロットバイオプシー開発

凝块活检作为一种新型炎症标志物搜索方法的发展

• 发表时间: 2022
• 作者: 松本 歩;南 彰;池田 潔;大坪 忠宗;金澤 寛明;紅林 佑希;高橋 忠伸;竹内 英之;吉田安宏
• 通讯作者: 吉田安宏

Established imaging analysis for endocytosis of particulate matters

建立颗粒物内吞作用的成像分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 戸島 麻耶;下竹 昭寛;音成 秀一郎;岡田 直;小林 勝哉;宇佐美 清英;松橋 眞生;吉田 健司;伏見 育崇;山尾 幸広;菊池 隆幸;吉田 和道;行木 孝夫;松本 理器;國枝 武治;高橋 良輔;宮本 享;池田 昭夫;今井あい子，木村大介，坂田裕香;Yoshida Y
• 通讯作者: Yoshida Y

好中球をモチーフにした環境汚染物質の生体影響評価法の開発

以中性粒细胞为基元的环境污染物生物影响评价方法的开发

• 发表时间: 2021
• 作者: 王?;三宅伸完;岡﨑龍史;吉田安宏
• 通讯作者: 吉田安宏