Unraveling the mechanisms of perineural invasion in pancreatic cancer using in vitro co-culture model

利用体外共培养模型揭示胰腺癌神经周围浸润的机制

• 批准号: 20K22838
• 负责人: 古橋 暁
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-03-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K22838/
• 关键词: 膵癌; 神経周囲浸潤; EphA4; RNA-seq; in vitro 共培養モデル

本講座で確立したIn vitro膵癌ー神経細胞共培養モデルを用いて、神経親和性のあるヒト膵癌細胞株(MIA paca2)と対照の膵癌細胞株（PANC-1)の遺伝子発現の網羅的解析(RNA-sequencing)を施行した。その解析の結果、神経細胞の刺激を受けたMIA paca2で高発現しているAxon guidance pathwayの分子の一つであるEphrin receptor A4 (EPHA4)に着目した。EPHA4がMIA Paca2にPANC-1に比べて高発現していることをRT-PCR及びWestern blottingでmRNA及び蛋白レベルで確認した。MIA Paca2内のEPHA4をノックダウンするとMIA paca2の持つ神経親和性がキャンセルされることを実証した。以上から、EPHA4が高頻度で起きる膵癌の特性の一つである神経周囲浸潤に関連があるのではないかと考察した。この結果を元に、複数回の全国学会の発表及び論文報告を行った。(Furuhashi S., et al.Ephrin Receptor A4 Expression Enhances Migration, Invasion and Neurotropism in Pancreatic Ductal Adenocarcinoma Cells. Anticancer Res, 41(4), 1733-1744. 2021.)

In this lecture, we established the RNA-sequencing of gene expression in vitro tumor cells co-cultured with MIA paca2 and PANC-1 cells. As a result of the analysis, MIA paca2 was highly expressed in neurons stimulated by Axon guidance pathway molecules, and Ephrin receptor A4 (EPHA4) was observed. EPHA4 and MIAPaca2 are highly expressed and confirmed by RT-PCR and Western blotting. EPHA4 in MIA Paca2 is demonstrated to be compatible with MIA Paca2. EPHA4 has been investigated for its high frequency of tumor initiation and its association with neurovascular infiltration. The results of this study were published in a number of national society reports and papers. (Furuhashi S., et al.Ephrin Receptor A4 Expression Enhances Migration, Invasion and Neurotropism in Pancreatic Ductal Adenocarcinoma Cells. Anticancer Res, 41(4), 1733-1744. 2021.)