a,b-Unsaturated carbonyl sulfation in response to oxidative stress
a,b-响应氧化应激的不饱和羰基硫酸化
基本信息
- 批准号:21H02119
- 负责人:
- 金额:$ 10.9万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本年度は、「硫酸化を受けるa,b-不飽和カルボニル化合物の探索その硫酸化代謝解析」と「酸化ストレスによるSULTの発現変動」を実施した。①硫酸化を受ける新たなa,b-不飽和カルボニル化合物の探索と代謝解析:カテコールアミンキノンとエストロゲンキノンをチロシナーゼにより合成し、酵素的硫酸化を確認できた。NAPQI硫酸化のKinetics解析を行い、SULT1C4が最も触媒効率の高い酵素であった。HepG2細胞におけるNAPQI代謝をLC-MSで解析した結果、NAPQI硫酸体の高いシグナルが検出でき、細胞内でのNAPQI代謝に硫酸化も寄与することが明らかとなった。さらに、細胞毒性試験の結果、SULT1C4を強発現した細胞ではNAPQIの毒性が大幅に減少し、硫酸化による解毒作用を確認できた。次に、ヒト臓器のLysareを用いた試験では、小腸の方が一番強い強い活性を示した。デジタルPCRを用いた発現解析の結果、肝臓と比較して、SULT1A3の小腸発現が高い結果となったことから、生体内ではSULT1A3がNAPQIの硫酸化を担っていることが想定された。②酸化と親電子ストレスによるSULTの発現変動解析:酸化ストレス下でのSULT発現変動を正確に解析するため、デジタルPCRによるmRNAの絶対定量解析の準備を整えた。過酸化水素処理によるSULTのタンパク質発現は定量質量分析法(MRM法)にて確認した。その結果、SULT1A3とSULT1C4の強い発現増強が確認できた。特に、SULT1C4は未処理のHepG2細胞ではほとんど発現が確認できなかったが、過酸化水素処理によって20-30倍近い発現が確認できた。SULT1C4は生体内での発現臓器が良く分かっていない酵素であることから、酸化ストレス刺激下で特異的に発現誘導される酵素である可能性が想定された。
This year, we implemented "Sulfation Metabolic Analysis of a, b-Unsaturated Sulphate Compound" and "Acidification of Sulfuric Acid". (1) Sulfation is a new phenomenon, a b-unsaturated compound is explored and metabolized, and synthesis and enzyme sulfation are confirmed. NAPQI sulfation Kinetics analysis, SULT1C4 is the most efficient enzyme LC-MS analysis of NAPQI metabolism in HepG2 cells, detection of NAPQI sulfate, and detection of NAPQI sulfate in cells In addition, the results of cytotoxicity tests, SULT1C4, strongly demonstrated that the toxicity of NAPQI was significantly reduced, and the detoxification effect of sulfation was confirmed. In addition, the Lysare of the small intestine is highly active. The results of PCR analysis, liver comparison, small intestine detection of SULT 1A3, and in vivo sulfation of SULT 1A3 and NAPQI were determined. (2) Analysis of the expression of SULT in acidified protein: preparation of mRNA for quantitative analysis under acidified protein The quality of water treated with acid is confirmed by quantitative mass analysis (MRM). Results, SULT1A3 and SULT1C4 were confirmed to be stronger. Special, SULT1C4 and untreated HepG2 cells were confirmed to be 20-30 times more likely to be detected after acidification treatment. SULT1C4 is a gene that produces enzymes in vivo. The possibility of producing enzymes specifically induced by acid stimulation is considered.
项目成果
期刊论文数量(25)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Investigation of radical scavenging effects of acetaminophen, <i>p</i>-aminophenol and their <i>O</i><i>-</i>sulfated conjugates
对乙酰氨基酚、<i>p</i>-氨基苯酚及其<i>O</i><i>-</i>硫酸化缀合物的自由基清除作用研究
- DOI:10.2131/jts.47.421
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Morita Chihiro;Tokunaga Yuki;Ueda Yuto;Ono Masateru;Kinoshita Hideki;Kurogi Katsuhisa;Sakakibara Yoichi;Suiko Masahito;Liu Ming-Cheh;Yasuda Shin
- 通讯作者:Yasuda Shin
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- DOI:
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:瀬川浩志;黒木勝久;児玉直輝;Ming-Cheh Liu;水光正仁;榊原陽一
- 通讯作者:榊原陽一
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- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:高山 千廣;古賀 綾乃;有田 頌彬;坂本 理沙;谷 元洋;瀬川 浩志,黒木 勝久,Ming-Cheh Liu,水光 正仁,榊原 陽一
- 通讯作者:瀬川 浩志,黒木 勝久,Ming-Cheh Liu,水光 正仁,榊原 陽一
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- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:黒木勝久;中野悠;水光正仁;榊原陽一
- 通讯作者:榊原陽一
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