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Establishment of a fast and efficient production method for pollen-free sugi seedlings by liquid culture technology

液体培养技术建立快速高效无花粉杉苗生产方法

基本信息

批准号：
21H02244
负责人：
丸山毅
金额：
$ 11.07万
依托单位：
Forest Research and Management Organization
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

当年度の研究実績は、以下のとおり。①初年度に得られた不定胚形成培養細胞を用いて、維持・増殖における液体培養条件を検討した。複数の培養細胞系統を対象に、塩類、糖類や成長調節物質（オーキシン、サイトカイニン、ペプチド）の変化による液体培地の培養細胞増殖に及ぼす影響を調べた。その結果、液体培地の組成の変化は細胞増殖に影響を与えるが、培地に対する反応は不定胚形成細胞系統によって著しく異なることが明らかとなった。②得られた培養細胞からの不定胚誘導を行い、胚分化能力の高い細胞を数系統選抜した。分化能力の高い細胞を用いて、不定胚成熟化における液体培養条件の検索を開始した。その結果、液体培養では、成熟に向かう細胞の発達が観察されたが、最終的に正常な子葉胚の形成までに至らなかった。引続き次年度は、不定胚の成熟化を改善させるための培養条件を再検討する。③不定胚への分化能力の高い不定胚形成細胞において特異的に発現する遺伝子を明らかにすることを目的に、発現遺伝子の網羅的解析（トランスクリプトーム）を行なった。4つの由来の異なる培養系統において、これまでに不定胚への分化能力が高いことが明らかとなった細胞系統および分化能力の低い細胞系統それぞれ3系統、合計で24系統の不定胚形成細胞よりRNAを抽出した。RNA-seqを行い、各サンプル4 Gb以上の発現遺伝子の配列データを得た。得られた配列データをスギの参照配列（SUGI ver. 1）にマッピングしたところ、それぞれ99.7%以上の配列をゲノム上にマッピングすることができた。また、RNA-Seqデータを活用してレトロトランスポゾンの解析を行い、合計26本のレトロトランスポゾンの配列が得られた。差次発現の解析では不定胚の誘導効率の高い細胞と低い細胞との間でレトロトランスポゾンの発現量を比較したところ、14本のレトロトランスポゾンの配列が有意な差次発現を示した。

In the current year, the following studies will be conducted. The main results are as follows: (1) at the beginning of the year, the conditions for the formation of adventitious embryos and the maintenance of liquid culture conditions for the formation of adventitious embryos were studied. The complex cell system makes a long-term effect on the growth of cells, plants, and sugars in liquid culture. The results of the experiment, the culture of liquid culture, the transformation of cell culture, the formation of cell system, and the formation of cell system. (2) it is necessary to improve the ability of embryo differentiation and selection of cell mathematical system. The differentiation ability of the cells was high, and the liquid culture conditions for maturation of adventitious embryos and maturation of adventitious embryos began. The results of the experiment, the liquid culture, the mature cells and the most normal embryos were observed. Introduce the "next year", adventitious embryos to "mature" to improve the conditions of cultivation and then improve the conditions. (3) the differentiation ability of adventitious embryos is high. Adventitious embryos form cells that are special to realize the goal of cell differentiation and the resolution of the network. 4. The reason for this is to improve the differentiation ability of the system, the ability of differentiation of the cell system, the ability of the cell system to differentiate, the low cell system, the 3 system, and the 24 system to form a cellular RNA extraction cell. In the RNA-seq line, each person has more than 4 Gb and is assigned to the column with a minimum of 4 minutes. The reference column (SUGI ver.) 1) in the first place, please tell me that more than 99.7% of the samples are allocated to each other, and that there is a problem on the list. A total of 26 books were published in total, including the number of books, and the number of books. In the differential analysis, there is an indefinite embryo rate, the rate is high, the cell is low, the cell is low, the cell is high, the cell is low, the cell is high, the cell is low, the cell is low.

项目成果

期刊论文数量（4）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

スギにおける不定胚誘導遺伝子の探索

在日本柳杉中寻找体细胞胚胎诱导基因

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kohyama Tetsuo I.;Sheil Douglas;Sun I-Fang;Niiyama Kaoru;Suzuki Eizi;Hiura Tsutom;Nishimura Naoyuki;Hoshizaki Kazuhiko;Wu Shu-Hui;Chao Wei-Chun;Nur Hajar Zamah S.;Rahajoe Joeni S.;Kohyama Takashi S.;伊津野彩子・丸山毅・上野真義・伊原徳子・森口喜成
通讯作者：
伊津野彩子・丸山毅・上野真義・伊原徳子・森口喜成

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