Development of micropropagation technology by inducing totipotent cells derived from vegetative tissues of adult Sugi and Hinoki trees

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令和４年度の研究実績は、以下のとおり。①スギ・ヒノキ成木の栄養器官から得られた無菌化の外植体を用いて、不定胚形成細胞や苗条原基などを誘導するための培養条件を探索した。その結果、誘導用培地にサイトカイニン（6-ベンジルアミノプリン、ゼアチン、メタトポリン）を主に添加する場合は、マルチシュート或いは苗条原基の誘導に対し、オーキシン（2,4-ジクロロフェノキシン酢酸、1-ナフチル酢酸、3-インドール酢酸）を主に添加する場合は、カルス或いは不定胚形成細胞の誘導が観察された。②スギ・ヒノキ成木の栄養器官から得られた無菌化のシュートを用いて、外植体の低温処理法やThin Cell Layer 培養法の効果を検証した。複数クローンのシュートを輪切りにし（薄さ0.5-1.0 mm）、オーキシンやサイトカイニン等を含む不定胚形成細胞誘導用培地に置床し、５℃（1-12週間）の低温処理を行った。その結果、ほぼすべての実験ではカルス形成が見られたものの、不定胚形成細胞の誘導がごくまれにしか観察されなかった。この結果は、培養条件又は外植体に施された処理のいずれかが適切ではなかったことを示唆された。引続き次年度は、不定胚形成細胞の誘導率を向上させるための培養条件を再検討する。