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Development of micropropagation technology by inducing totipotent cells derived from vegetative tissues of adult Sugi and Hinoki trees

通过诱导来自成年杉树和扁柏树营养组织的全能细胞开发微繁殖技术

基本信息

批准号：
21K19154
负责人：
丸山毅
金额：
$ 4.16万
依托单位：
Forest Research and Management Organization
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-07-09 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

令和４年度の研究実績は、以下のとおり。①スギ・ヒノキ成木の栄養器官から得られた無菌化の外植体を用いて、不定胚形成細胞や苗条原基などを誘導するための培養条件を探索した。その結果、誘導用培地にサイトカイニン（6-ベンジルアミノプリン、ゼアチン、メタトポリン）を主に添加する場合は、マルチシュート或いは苗条原基の誘導に対し、オーキシン（2,4-ジクロロフェノキシン酢酸、1-ナフチル酢酸、3-インドール酢酸）を主に添加する場合は、カルス或いは不定胚形成細胞の誘導が観察された。②スギ・ヒノキ成木の栄養器官から得られた無菌化のシュートを用いて、外植体の低温処理法やThin Cell Layer 培養法の効果を検証した。複数クローンのシュートを輪切りにし（薄さ0.5-1.0 mm）、オーキシンやサイトカイニン等を含む不定胚形成細胞誘導用培地に置床し、５℃（1-12週間）の低温処理を行った。その結果、ほぼすべての実験ではカルス形成が見られたものの、不定胚形成細胞の誘導がごくまれにしか観察されなかった。この結果は、培養条件又は外植体に施された処理のいずれかが適切ではなかったことを示唆された。引続き次年度は、不定胚形成細胞の誘導率を向上させるための培養条件を再検討する。

4 years of research results, the following. To explore the culture conditions for the development of sterile explants and the induction of slender embryos in mature trees. As a result, induction of adventitious embryogenic cells was observed in the presence of medium or medium medium induction of slender primordia or medium induction of adventitious embryogenic cells in the presence of medium or medium induction of 2, 4-diacetic acid, 1-diacetic acid, 3-diacetic acid. 2. The results of culture of mature trees by low temperature treatment and Thin Cell Layer culture were verified. The culture medium for induction of adventitious embryo formation was placed at 5℃ (1-12 weeks) and treated at low temperature. As a result, the induction of adventitious embryo formation cells was observed. The culture conditions are appropriate for the explants. The induction rate of adventitious embryogenic cells increased in the first five years and the culture conditions were discussed again.