Mechanism of diploid gamete formation and its application for genetic breeding

二倍体配子形成机制及其在遗传育种中的应用

基本信息

批准号：
21H02278
负责人：
藤本貴史
金额：
$ 11.48万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02278/
关键词：
非還元配偶子形成クローン雑種ゲノム倍加倍数体

项目摘要

①ゲノム倍加を生じる系統間ゲノムの違い　2021年度に構築したドジョウのドラフトゲノムのクオリティーをさらに高めるために、A系統およびB系統に加え、新たに取得したクローン系統を用いたオプティカルゲノムマッピング法によるゲノム解析に取り組んだ。また、Genomic in situ hybridization（GISH）によるドジョウA、B系統間の染色体構造の比較解析では、A系統をプローブDNAに用いたGISHを、二系統間雑種の染色体標本に対して実施したところ、A系統由来と推定される染色体全域でプローブ由来の強いシグナルが確認されたため、二系統間では染色体レベルの大きな配列変異が生じている可能性が示唆された。②ゲノム倍加の分子機構の解明　ドジョウの生殖腺発達過程における生殖細胞の形態変化と核サイズ変化についてステージングを行った結果、野生型とクローン系統ともに、孵化直後の生殖細胞から減数分裂までの生殖細胞を6段階のステージに分類できた。野生型とクローン系統における生殖細胞の核サイズを、各ステージで比較した結果、クローン系統では減数分裂前の卵原細胞で有意に大きいことが明らかとなった。一方、セルソーターによる発達卵巣からの卵原細胞分離では、細胞解離時の卵黄片が多数発生し、核染色DNA量、前方散乱光、側方散乱光からは明瞭な卵原細胞集団を特定できなかった。しかしながら、クローン系統でのpiwiプロモーター領域とEGFPからなるコンストラクトを導入した遺伝子組換え個体では生殖細胞にEGFP蛍光を有する系統の樹立に成功した。③雑種由来の二倍性配偶子の育種応用に向けた実証研究　ドジョウ系統間雑種と雑種由来複二倍体ではクローン性非還元配偶子の形成が認められた。また、ブラウントラウトとタイセイヨウサケの交雑魚から卵が得られ、極体放出処理をともなわない雌性発生により生存個体を誘起できた。

1）互认为基因组的差异导致基因组增加一倍以进一步提高2021年构建的LOACH基因组草案的质量，我们使用新获得的克隆菌株使用光学基因组映射方法进行了基因组分析，此外，除了菌株A和B.外，其他BB。此外，在基因组中使用了基因组的特征（gish），gish and crom and crom and crom nistim nistim nistim and crom ans gish and crom and crom ans gish and crom and crom and crom and crom and crom nistim nistim nistim nister n Intercim nistem nister an杂种，从探针中确认了探针的强信号，该探针跨假定菌株A衍生而成，这表明两种菌株之间可能发生染色体水平的大序列突变。 2。阐明基因组的分子机制加倍：由于生殖细胞的分期和核大小的分期变化，在洛奇的性腺发育过程中，野生型和克隆线都能够在孵化至减数分裂分为六个阶段后立即从生殖细胞分类。在每个阶段比较野生型和克隆谱系中生殖细胞的核大小，表明克隆谱系在前虫卵母细胞中明显更大。另一方面，当使用细胞分隔器与发达的卵巢分离o蛋白细胞时，在细胞解离时会产生许多蛋黄碎片，并且无法从核染色的DNA，正向散射的光和侧面散射光中从核染色DNA的量中鉴定出明显的绿蛋白细胞群体。但是，在克隆线中引入了由PIWI启动子区域和EGFP组成的构造的转基因个体中，我们能够在生殖细胞中成功建立具有EGFP荧光的线。 3）关于杂种二倍体配子的繁殖应用的实证研究：在LOACH和杂种的杂种中观察到克隆非还原配子的形成。此外，从棕色鳟鱼和鲑鱼的十字架上获得卵，并且可以通过不涉及极性身体释放治疗的女性发育来诱发幸存的个体。

项目成果

期刊论文数量（14）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

ドジョウ系統間雑種における非還元配偶子形成の遺伝性

泥鳅间系杂种非减配子发生的遗传力

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
6.Kabir A.;Ieda R.;Hosoya S.;Fujikawa D.;Atsumi K.;Tajima S.;Nozawa A.;Hirase S.;Koyama T.;Nakamura O.;Kadota M.;Nishimura O.;Kuraku S.;Nakamura Y.;Kobayashi H.;Toyoda A.;Tasumi S.;Kikuchi K.;柴田季子・西村俊哉・藤本貴史
通讯作者：
柴田季子・西村俊哉・藤本貴史

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