魚類の精子を用いた遺伝資源の保存と個体再生に関する研究

鱼类遗传资源保存及个体繁殖研究

• 批准号: 18780138
• 负责人: 藤本 貴史
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18780138/
• 关键词: 凍結保存; ドジョウ; バイオテクノロジー; 発生・分化; 顕微授精

本年度は、初年度に開発した技術の応用と個体の解析に主眼をおいて研究を行った。凍結保存精子からの個体再生実験では、ドジョウ凍結精子と通常卵との受精からは孵化仔魚を得ることができたが、凍結精子を用いた人為雄性発生では生存性の孵化仔魚を得ることができず、精子ゲノムのみでの個体再生には至らなかった。しかしながら、ドジョウ精子の凍結保存方法を他のドジョウ属魚類(カラドジョウ、フクドジョウ、エゾホトケドジョウ)へ応用したところ、本実験で用いたドジョウ属魚類の凍結精子は解凍後にも運動性を示したことから、本研究で開発した凍結保存方法が広範囲のドジョウ属魚類に応用可能であることが示された。二倍性精子に関しては、まず、初年度に作製した新四倍体系統が産する二倍性精子に由来する雄性発生個体の雄の妊性を確認した。これらの成熟した個体からは受精能を有する半数性精子が産出され、正常個体が生じたことから、新四倍体系統の産する二倍性精子は再生産可能な二倍体個体を作出できることが明らかとなった。次に、本年度ではポリエチレングリコール溶液(PEG)と高カルシウム溶液(高Ca)を用いた化学処理を施し、通常二倍体が産する半数性精子の接着・融合による倍加法を検討した。核とミトコンドリアを蛍光染色した精子の形態観察では、処理群においてのみ接着・融合している精子が観察された。また、各化学処理を比較したところ、PEG処理では僅かに接着・融合精子が見受けられるものの、PEG濃度の増加とともに精子の運動性が顕著に低下し、多数の精子凝集塊が生じた。一方、高Ca処理では、精子の運動性は濃度や処理時間によって大きな影響は受けず、PEG処理よりも多数の接着・融合精子が生じた。このことから、高Ca処理は精子の接着・融合に有効な処理方法であると考えられた。

In this year and the beginning of the year, we started to develop technology and analyze it individually and conduct research on it. Frozen preserved sperm, individual regeneration, frozen sperm, normal eggs, fertilized eggs, hatching of larvae, frozen The sperm is used to produce the male male and hatch the larvae for survival, and the sperm is used to regenerate the individual into the sperm. How to freeze and preserve sperm of しかしながら and ドジョウをのドジョウ belongs to fish (カラドジョウ、フクドジョウ、エゾホトケドジョウ)へ応用したところ、本実験で用いたThe motility of frozen spermatozoa from fish belonging to the genus Duracus after thawing has been demonstrated. This study has not yet been carried out. How to freeze and preserve fish? The origin of diploid sperm is the origin of the new tetraploid system and the birth of the new tetraploid system. The birth of male individuals is confirmed. The mature individual can be fertilized and half of the sperm can be produced, the normal individual is born and the sperm can be fertilized. The new tetraploid system enables the reproduction of diploid sperm and the possibility of producing diploid individuals. Next time, this year's ではポリエチレングリコール solution (PEG) and high カカルシウム solution (high Ca) are used Chemical treatment is applied, and diploid production is usually carried out by semi-sperm production, followed by fusion and doubling. Nuclear とミトコンドリアを蛍optical staining したsperm morphological inspection では, processing group においてのみ and then fusion している sperm が看された.また, each chemical treatment を comparison したところ, PEG treatment では only かに ・fusion of sperm が见见けられるもThe PEG concentration increased, the motility of the sperm decreased, and the majority of sperm agglomerates were produced. On the one hand, high Ca treatment, sperm motility, concentration, and treatment time are affected by large amounts of sperm, and PEG treatment, many sperm are followed and fused. It is a treatment method that is effective in connecting and merging sperm with high Ca treatment.

项目成果

Evaluation of different doses of UV irradiation to loach eggs for genetic inactivation of the maternal genome

• DOI: 10.1002/jez.398
• 发表时间: 2007-08-01
• 期刊: JOURNAL OF EXPERIMENTAL ZOOLOGY PART A-ECOLOGICAL AND INTEGRATIVE PHYSIOLOGY
• 影响因子: 2.8
• 作者: Fujimoto, Takafumi;Sakao, Suzu;Arai, Katsutoshi
• 通讯作者: Arai, Katsutoshi

Sperm cryopreservation in the loach: a new method to control cooling rates with the straw and powdered dry-ice (ストローとドライアイスを用いた冷却速度制御による精子凍結保存の新方法)

泥鳅精子冷冻保存：利用秸秆和干冰粉控制冷却速率的新方法

• 发表时间: 2007
• 作者: Norihiro Futamura;Tokuko Ujino-Ihara;Mitsuru Nishiguchi;Hiroyuki Kanamori;Kensuke Yoshimura;Masahiro Sakaguchi;Kenji Shinohara;Norihiro Futamura;森口喜成;二村典宏;篠原健司;二村典宏;二村典宏;篠原健司;二村典宏;二村典宏;Norihiro Futamura;Takafumi Fujimoto;George Shigueki Yasui
• 通讯作者: George Shigueki Yasui