Molecular basis of counteraction against the JAK-STAT signaling pathway by virus

点击翻译按钮获取中文摘要

ウイルスがどの生物を宿主として選択するかを考える上で，宿主免疫系を不活化できるかどうかは非常に大きな要因である。多くのウイルスは宿主の免疫分子と結合するための蛋白質を準備し，固有の方法で免疫系を制圧する。本研究では，ヒトに重篤な障害・死をもたらすRNAウイルスが，ヒトJAK-STAT経路を不活化する戦略を明らかにしてきた。麻疹ウイルスV蛋白質のN末端ドメインはSTAT1と，C末端ドメインはSTAT2とそれぞれ特異的に結合するが，さらに我々は，C末端ドメインを削ったコンストラクトの作成に成功し，ゲル濾過クロマトグラフィ等で相互作用解析をおこない，結合最小領域であることを突き止めた。X線結晶構造解析を目指し，現在共結晶化試行中である。本結果は生物物理学会等で報告した。また，このドメインは単独で結晶化しないと予測されることから，NMR構造解析に着手しており，1H-15N HMQCにより測定条件の検討を進めた。狂犬病ウイルスP蛋白質とSTATの電子顕微鏡単粒子解析では，相互作用評価をさらに綿密におこなった。また，STATのループ領域にNZ1抗体のエピトープ配列を挿入し，NZ1clasp抗体を使ってSTATの性質を変える試みをおこなった。NZ1抗体が結合した状態で，STATとPとの同程度のKD値が得られたため，こちらの電顕構造解析のためのグリッド作成もおこなう予定である。複合体形成条件や氷包埋条件の検討を進め，200 kV電顕により測定をおこなった後３次元モデル構築をおこない，適切な条件を評価中である。