新規リン脂質定量法を用いた動脈硬化性疾患のリバーストランスレーショナルリサーチ

使用新的磷脂测定方法对动脉硬化疾病进行反向转化研究

基本信息

批准号：
21H02642
负责人：
森田真也
金额：
$ 10.98万
依托单位：
Shiga University of Medical Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02642/
关键词：
リン脂質

项目摘要

リン脂質は、低密度リポタンパク(LDL)や高密度リポタンパク(HDL)などリポタンパク粒子の表面膜を構成し、その代謝を決定付けていることから、動脈硬化の進行に重要な働きをしていることが予想されるが、リン脂質と動脈硬化性疾患との関係についての研究は極めて少ない。研究代表者は、これまでに、主要リン脂質クラスに対するハイスループット酵素蛍光定量法を開発している。本研究では、その網羅的定量法を臨床研究に応用し、各リン脂質クラスが動脈硬化性疾患(冠動脈疾患・脳梗塞)の危険因子あるいは防御因子としてのバイオマーカーとなるか検証する。血漿リポタンパク粒子に含まれている主なリン脂質は、ホスファチジルコリン(PC)・ホスファチジルエタノールアミン(PE)・スフィンゴミエリン(SM)である。今年度は、開発したリン脂質クラス酵素蛍光定量法を応用し、ヒト血漿から超遠心により分離したHDL・LDL・超低密度リポタンパク(VLDL)に対するPC・PE・SMの酵素蛍光定量法の妥当性について、再現性試験・添加回収試験・希釈試験により評価し、全てのリポタンパクで良好な結果が得られた。これにより、ヒト血漿中のHDL・LDL・VLDLに含まれるPC・PE・SMを高感度かつ高精度で定量する方法を確立できた。従来法では測定が困難であったため、各リポタンパクのリン脂質クラス組成に関する情報は極めて少なかったが、本定量法により、簡便に各リポタンパク中のリン脂質クラス組成を求めることが可能となった。また、リゾリン脂質の酵素蛍光定量法の開発に必要なホスホリパーゼD（PLD）の探索を行ったところ、リゾホスファチジルコリン(LPC)またはリゾホスファチジルエタノールアミン(LPE)に特異的なPLD生産能を示す菌株をそれぞれ1種ずつ見出すことができた。

磷脂形成脂蛋白颗粒的表面膜，例如低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL），并确定它们的代谢，并有望在动脉粥样硬化的进展中起重要作用，但是对磷酸化和磷酸化和arterii canterioscs的关系很少研究。主要研究者先前已经为主要磷脂类别开发了高通量酶荧光测定。在这项研究中，全面的定量方法应用于临床研究，并检查每个磷脂类是动脉粥样硬化疾病（冠状动脉疾病和脑梗塞）的危险因素或保护因素的生物标志物。血浆脂蛋白颗粒中包含的主要磷脂是磷脂酰胆碱（PC），磷脂酰乙醇胺（PE）和鞘磷脂（SM）。今年，我们应用了开发的磷脂级酶荧光测定法，并评估了HDL，LDL和超低密度脂蛋白（VLDL）对PC，PE和SM的酶荧光测定的有效性，并使用超耐渗透性测试，以及使用良好的测试，以及使用良好的测试，以及使用良好的测试，以及使用重新启用的效果，以及使用重新启动的验证，以及使用重新启动测试，以及良好的结果。脂蛋白。这使得建立了一种量化HDL，LDL和VLDL中包含的PC，PES和SMS的方法，具有高灵敏度和准确性。由于常规方法很难进行测量，因此关于每种脂蛋白的磷脂类组成的信息极少，但是这种定量方法使得可以轻松确定每种脂蛋白的磷脂类组成是可能的。此外，当我们搜索磷脂酶D（PLD）时，这对于开发溶血磷脂的酶荧光测定所必需时，我们发现每种菌株都具有产生特异性PLD的溶血磷脂酰胆碱（LPC）或溶血磷脂酰磷脂酰胺乙醇胺（LPE）的能力。