Generation of purely pluripotent stem cell derived lung organ

纯多能干细胞来源的肺器官的产生

• 批准号: 21H02923
• 负责人: 西條 康夫
• 金额: $ 10.4万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02923/
• 关键词: ガストロイド; 肺臓器作出; 多能性幹細胞; ES細胞

本研究の目的は、マウスES細胞からガストロイドを作出し、肺発生に関わる遺伝子発現を解析すると共に、ガストロイドの培養をさらに継続し、肺臓器が出来るかを確認することである。まず、マウスES細胞を既報に従い、ガストロイドを作成する。作成したガストロイドにおける肺発生に関わる遺伝子群の発現を動的に解析する。特に、肺初期発生に重要なNKx2-1とその後の肺形成に重要なFGF10/FGFR2が発現しているかを解析する。またガスロイドの培養を継続して、肺が形成可能かを組織学的に解析する。また、ガストロイドを、トロファブラストと一緒に偽妊娠マウス子宮に移植し、個体発生が可能か、個体発生が出来ないなら何が問題かを見極める。具体的には以下の６点について、明らかにする。１）マウスES細胞によるガストロイドの作成、２）ガストロイドにおける肺発生に関わる遺伝子の発現解析、３）ガストロイドの培養継続による肺臓器発生の可能性、４）ガストロイドとトロフォブラスト移入による個体発生の可能性。具体的には、ESLIF medium で培養されたES細胞を96 well plateで培養を開始し、48時間後にChironを含むN2B27medium に変えて、72時間後、N2B27 medium単独に変え培養を継続した。120時間後は、shaking しながら培養を行いガストロイドの発生分化を促した。。得られたマウスヒトガストロイドの組織および遺伝子発現を解析した。その結果、ES細胞は凝集し、個体を形成した。組織学的には、原腸や肺芽の発生は確認できなかった。

The purpose of this study is to create the ES cell system and to solve the problem of lung disease. Analyze the すると公に, ガストロイドの culture をさらに継続し, and the lung organ が come out るかをconfirm することである.まず、マウスES cellを に従い、ガストロイドを成する. The analysis of the movement of the したガストロイドにおけるpulmonary 発生に关わる缝子组の発appearsを move. Characteristics: NKx2-1 is important in early lung development and subsequent lung formation is important, and FGF10/FGFR2 is now analyzed. It is possible to culture the lungs and analyze the histology of the lungs.また、ガストロイドを、トロファブラストと一道にpseudopregnancyマウスuterine migration Planting is possible, individual disease is possible, individual disease is coming out, and the problem is obvious. The specific details are as follows: について, 明らかにする. 1) Creation of MASES cell によるガストロイドの, 2) ガストロイドにおけるpulmonary 発生に关わる伝子の発existing analysis, ３) ガThe possibility of cultivating ストロイドの継続によるpulmonary organ 発発, ４）ガスThere is a possibility of individual disease occurring in Torotech. Specific details: ESLIF medium, culture of ES cells, 96 well plate, start of culture, Chiron after 48 hours, N2B27 medium, N2B27 after 72 hours The medium is the only one that can be cultivated. After 120 hours, it is a good way to stimulate the growth and differentiation of the body. . Get the られたマウスヒトガストロイドのorganization および缝子発 appear をanalytic した. As a result, ES cells agglutinated and individuals were formed. Histological confirmation of gastritis and lung buds was confirmed.