動的ゴーストイメージング技術を用いた高骨形成細胞集団の分取と機能的再生骨の実現

利用动态鬼影成像技术分离高成骨细胞群并实现功能性再生骨

• 批准号: 21H03136
• 负责人: 星 和人
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H03136/
• 关键词: 骨再生; 動的ゴーストイメージング; 細胞分離

採取直後のマウス骨髄細胞（未処理）、それを赤血球破砕処理したもの、さらにFicollにより単核球を分取したものについて、前年度の解析結果では、赤血球破砕処理したもので最も骨芽細胞分化能が高く、Ficollで単核球を分取したものにおいて最も低いという結果であった。この結果をさらに検証するために、細胞数をそろえて3群の細胞を播種し、骨芽細胞分化能を比較したが、やはり同様の結果であった。これは、骨芽細胞前駆細胞の基となる間葉系幹細胞はFicollによる単核球分取により濃縮され、骨形成が良好となるという予想に反するものであった。Ficollにより単核球を分取した群において骨芽細胞分化が低くなる理由については、1．Ficollによる単核球分取では間葉系幹細胞が濃縮されていると仮定していたが、実際は何らかの原因で濃縮されていない可能性、2．間葉系幹細胞以外の細胞が骨芽細胞分化を促進しており、Ficollによる分取でそれらの細胞が失われる可能性、が考えられた。そのため、まず上記1の仮説について、間葉系幹細胞マーカーであるCD90, CD105等の発現についてフローサイトメトリーでの検証を行った。しかし、採取直後の骨髄細胞は非常に雑多な集団であり、明らかな傾向がつかめなかった。そのため、多重染色による細胞集団の解析を開始している。また、ハイドロゲルについては、I型コラーゲンとII型コラーゲンの混和物についても検討を進めており、その混合割合を変えた際の細胞増殖能などについて解析を行った。

Take straight after の マ ウ ス bone marrow cells (not 処 principle), そ れ を red blood corpuscle broken 砕 処 Richard し た も の, さ ら に Ficoll に よ り 単 nuclear ball を divide し た も の に つ い て, before the annual の analytic results で は, red blood cell broken 砕 処 Richard し た も の で most も bone bud differentiation can high が く, Ficoll で 単 nuclear ball を divide し た も の に お い て も most low Youdaoplaceholder0 と う result であった. こ の results を さ ら に 検 card す る た め に, cell number を そ ろ え て 3 group of の cells を seeding し, bone bud differentiation are を し た が, や は り with others の results で あ っ た. こ れ は 駆 before bud cells, bone cells の base と な among る leaf stem cells は Ficoll に よ る 単 nuclear ball divide に よ り enrichment さ れ, good bone formation が と な る と い う to think に anti す る も の で あ っ た. Ficoll に よ り 単 nuclear ball を divide し た group に お い て bone bud differentiation が low く な る reason に つ い て は, 1. Ficoll に よ る 単 nuclear ball divide で が concentrated among は leaf stem cells さ れ て い る と 仮 set し て い た が, the event be は ら か の reason で enrichment さ れ て い な い possibility, 2. Department of mesenchymal stem cells outside の cells が bone bud differentiation を promote し て お り, Ficoll に よ る divide で そ れ ら が の cells lost わ れ る possibility, が exam え ら れ た. そ の た め, ま ず written 1 の 仮 said に つ い て, mesenchymal stem cells マ ー カ ー で あ る CD90, CD105 and の 発 now に つ い て フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー で の 検 line card を っ た. The posterior spur bone marrow cells are <s:1> very に雑 numerous な clusters であ, and there is a clear ら な な tendency to が めな めな めな った った. Youdaoplaceholder0 ため ため, multiple staining による cell clusters そ analysis を begins て て る る. ま た, ハ イ ド ロ ゲ ル に つ い て は, type I コ ラ ー ゲ ン と II コ ラ ー ゲ ン の mixture に つ い て も beg を 検 into め て お り, そ の mixed cut close を - え た interstate の cells raised colonization な ど に つ い analytical line を っ て た.

项目成果

細胞分裂速度の異なる軟骨細胞の特性評価および純化分離方法の検討

不同细胞分裂率软骨细胞的表征及纯化分离方法的研究

• 发表时间: 2022
• 作者: 清水 玲那;浅輪 幸世;能丸 寛子;古村 眞;星 和人;疋田 温彦
• 通讯作者: 疋田 温彦

Applications of machine vision-based cell sorting for clinical diagnosis and cell therapy

基于机器视觉的细胞分选在临床诊断和细胞治疗中的应用

• 发表时间: 2022
• 作者: Kazuki Teranishi;Hiroko Nomaru;Reina Shimizu;Satoru Akai;Yuri An;Kaoru Komoriya,Yoko Kawamura;Asako Tsubouchi;Yukiyo Asawa;Atsuhiko Hikita;Yusuke Konishi;Kazuto Hoshi;Seiichiro Tabata;Sadao Ota
• 通讯作者: Sadao Ota

Requirement of direct contact between chondrocytes and macrophages for the maturation of regenerative cartilage.

• DOI: 10.1038/s41598-021-01437-6
• 发表时间: 2021-11-18
• 期刊: Scientific reports
• 影响因子: 4.6
• 作者: Kanda K;Asawa Y;Inaki R;Fujihara Y;Hoshi K;Hikita A
• 通讯作者: Hikita A

Involvement of impaired angiogenesis and myelosuppression in antiresorptive-agent related osteonecrosis of the jaw mouse model

血管生成受损和骨髓抑制参与抗吸收剂相关的颌骨小鼠模型骨坏死

• 发表时间: 2023
• 期刊: Tokai J Exp Clin Med.
• 作者: Hisao Igarashi;Satoru Nishizawa;Takeshi Miyamoto;Atsuhiko Hikita;Kazuto Hoshi
• 通讯作者: Kazuto Hoshi

Label-free machine vision-based cell sorting for tissue engineering

用于组织工程的无标签机器视觉细胞分选

• 发表时间: 2022
• 作者: H. Nomaru;R. Shimizu;K. Teranishi;Y. Asawa;Y. Kawamura;A. Hikita;K. Hoshi
• 通讯作者: K. Hoshi