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Modification of mitochondrial function by myoglobin located in inner-mitochondria space in myocytes

位于肌细胞线粒体内空间的肌红蛋白对线粒体功能的修饰

基本信息

批准号：
21H03318
负责人：
増田和実
金额：
$ 10.98万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

筋のミトコンドリア（Mito）の基質酸化能力の向上は細胞機能の恒常性にとって重要な要素である。R3年度のでは細胞質の酸素結合タンパク質であるミオグロビン（Mb）がMitoに内在して呼吸鎖複合体との相互作用を通じてMito呼吸機能を高めている可能性を見出した。ここで示唆されたTOM複合体のサブユニットであるTom20やTom70とMbとの相互作用がMbの輸送機能を果たしているのか否かを検証するために、C2C12筋芽細胞のMitoのTOM複合体のサブユニットの発現量を操作した。C2C12筋芽細胞にTom20-siRNAとTom70-siRNAの両方、あるいはTom40-siRNAを48時間導入した後、分化誘導をかけた。分化誘導72時間後のC2C12筋管細胞からMitoを単離し、ウェスタンブロット法によってMb等を検出した。腓腹筋深層部およびC2C12筋管細胞のMito画分をTom20とTom70でIPすると、両IPサンプルからMbが検出された。一方、C2C12筋管細胞のTom20とTom70を同時に発現抑制しても、Mito画分のMb発現量は変化しなかった。また、TOM複合体の通過口であるTom40を発現抑制したC2C12筋管細胞においても、Mito画分のMb発現量は変化しなかった。これらの結果から、MbがTOM複合体の受容体と何らかの相互作用はしているものの、それらの相互作用はTOM複合体を介したMito内部へのMb輸送に関与しない可能性が示唆された。

Mito's ability to acidify the matrix is an important factor in cell function constancy. In R3, the interaction between cytosolic acid-binding protein (Mb) and Mito's intrinsic respiratory lock complex was found to be highly probable. The interaction between Tom20 and Tom70 and Mb results in the detection of the presence of Tom 20 and Mb in C2C12 cells. C2C12 cells were induced to differentiate after 48 hours of introduction of Tom20-siRNA and Tom70-siRNA. After 72 hours of differentiation, C2C12 tendon cells were isolated and differentiated. Mito mapping of the muscle tube cells in the deep part of the abdominal muscle: Tom20, Tom70, IP, IP, Mb, etc. Tom20 and Tom70 of one side and C2C12 tendon cells were inhibited simultaneously, and the amount of Mb in Mito cells was decreased. The expression of TOM complex in C2C12 muscle cells was inhibited by the expression of TOM40 in the muscle cells. As a result, the interaction between Mb and TOM complex is related to the possibility of Mb transport within TOM complex.