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子宮内膜脱落膜化におけるミトコンドリアダイナミクスの解明と病態への関与

阐明子宫内膜蜕膜化中的线粒体动力学及其与病理学的关系

基本信息

批准号：
19K18679
负责人：
田丸俊輔
金额：
$ 2.41万
依托单位：
Saitama Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

研究参加に同意した対象例の手術により得られた子宮検体から、子宮内膜間質細胞を分離・培養した。培養した子宮内膜間質細胞に脱落膜化刺激を行い、脱落膜化分化をさせた細胞（脱落膜化群）と、脱落膜化していない細胞（コントロール群）を作成し、各実験系で両群間の相違を比較検討した。RI標識したパルミチン酸を指標としてミトコンドリアの脂肪酸β酸化活性を評価し、脱落膜化群で脂肪酸β酸化活性が上昇することを確認した。一方で、脂肪酸β酸化の基質であるアシルCoAの、ミトコンドリアへの取り込みを制御するCPT1の発現は低下することを確認した。蛍光・電子顕微鏡による細胞形態の観察を行い、脱落膜化群でミトコンドリア数の増加と、細胞質の脂肪滴増加を確認した。また、細胞内ミトコンドリアの分裂に必要なDrp1について、免疫染色にてタンパク量発現の評価を行い、脱落膜化群ではDrp1の発現が増強することを確認した。また、ミトコンドリア分裂に関与する遺伝子群に関してRT-qPCR法による発現量の評価を行った。その結果、ミトコンドリアの分裂に重要なDRP1、DRP1と協調して働くMiD51、Mffの発現が脱落膜化群で上昇し、MiD49は発現が低下することがわかった。一方で、DRP1の分解に重要な役割を果たすMITOLの発現は不変であった。さらに、脂肪酸β酸化を調節する遺伝子群についてRT-qPCR法による発現量の評価を行い、脱落膜化群ではACADMの発現が低下し、ACSM5の発現は上昇することを確認した。

The study participated in に and agreed to たた on the case of <s:1> surgery によ and によ to obtain られた uterine 検 body らら and を isolation and culture of endometrial stromal cells た. Cultivate した endometrial stromal cell line をいに off membrane is stimulation, peeling membrane differentiation をさせた cells (off film group) と, peeling membrane していない cells (コントロール group) を make し, all be 験 department で struck between group のを deemed more beg し検た. RI logo したパルミチン acid を index としてミトコンドリアの fatty acids beta acidification active を review 価し beta acidification, peeling membrane group で fatty acids active が rise することを confirm した. Party で, beta fatty acid acidification の matrix であるアシル CoA の, ミトコンドリアへの take り込みを suppression する CPT1 の発 now low はすることを confirm した. 蛍 light, electronic 顕 micromirror による cells form の観 examine を line い, peeling membrane group でミトコンドリア number の raised plus と, cytoplasm の fat drops of rights and を confirm した. また, intracellular ミトコンドリアの split に necessary な Drp1 について, immune dyeing にてタンパ発ク quantity is の review 価を line い, peeling membrane group では Drp1 の発が now raised strong することを confirm した. また, ミトコンドリア split に masato and する heritage 伝 subgroup に masato して RT - qPCR method による発 amount is の review 価を line った. その results, ミトコンドリアの split に important な DRP1, DRP1 と coordination して働く MiD51, Mff の発が off membrane is now rising group of でし, MiD49 は発 now low がすることがわかった. One side で, DRP1 further decomposes に important な fruit を fruit たすMITOL <s:1> shows であった invariability であった. さらに, beta fatty acid acidification を regulating する heritage 伝 subgroup について RT - qPCR method による発 amount is の review 価を line い, peeling membrane group では ACADM の発がし, now ACSM5 の発 now rising はすることを confirm した.