マイクロＲＮＡによる胎盤内鉄代謝の制御機構に関する研究

microRNA调控胎盘铁代谢机制的研究

• 批准号: 15K20158
• 负责人: 田丸 俊輔
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Saitama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-01 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15K20158/
• 关键词: マイクロRNA; 鉄代謝; 低酸素環境; 胎盤; 絨毛細胞

妊娠高血圧腎症や胎児発育不全の胎盤では、鉄代謝が大きく変化することが知られている。また、遺伝子発現の調節を行うマイクロRNA（miRNA）が、酸素濃度により胎盤で発現変動することが報告され、とりわけmiR-210は低酸素における遺伝子発現のkey regulatorとして注目されている。in silicoの解析では、miR-210が鉄代謝に関与するトランスフェリン受容体（TFRC）を標的遺伝子とする可能性が示唆されたため、これらに着目して本研究を進めた。1.ヒト絨毛由来細胞株における低酸素環境でのmiR-210とTFRC遺伝子発現変動の検討　ヒト絨毛由来細胞株としてHTR-8/SVneoを用いた。同細胞株を2%と20%の酸素濃度条件下で培養し、発現変動を検討したところ、miR-210の発現は2%酸素濃度下で上昇し、TFRCの発現は低下した。次に絨毛癌細胞株のJAR細胞を用いて、同様の条件での検討を開始した。2.miR-210の発現調節をしたヒト絨毛由来細胞株におけるTFRC遺伝子発現変動の検討　まずHTR-8/SVneoとJAR細胞を用いて、miR-210mimicおよびinhibitorを一過性にトランスフェクションするための条件を確立した。この条件下で、TFRCおよび鉄代謝関連遺伝子の発現変動の検討を開始した。3.ヒト胎盤組織を用いた実験系の確立　妊娠満期のヒト胎盤を用いた研究に関してH27年度に院内IRBの承認が得られたため、合併症のない妊婦において症例の蓄積を進めた。H28年度は、細胞の単離・培養や免疫染色等の条件検討を進めたが、海外留学の機会を得たため年度途中で本研究は中断することとなった。留学終了後には、これまでに得られている知見を活かして、さらに本テーマの研究内容を発展させたいと考えている。

Pregnancy hypertension kidney disease, fetal infertility placenta, iron metabolism, large changes in the status of knowledge MiRNA (miRNA), miRNA concentration, placental development, miRNA-210, miRNA-210 The analysis of miR-210 in silico is related to iron metabolism and the possibility of expression of TFRC is discussed. 1. MiRs-210 and TFRC gene development in the presence of low acid content in the villus derived cell line HTR-8/SVneo When the same cell line was cultured at 2% and 20% acid concentration, the expression of miR-210 increased and TFRC decreased. The study of JAR cells in the second choriocarcinoma cell line was started under the same conditions. 2. The regulation of miR-210 expression in human chorionic villi derived cell lines was investigated. The conditions for transient expression of miR-210mimic and inhibitor in HTR-8/SVneo and JAR cells were established. Under these conditions, TFRC and iron metabolism-related gene development model is discussed. 3. Placental tissue use is related to the establishment of pregnancy and placental use studies in H27, and the accumulation of complications in pregnant women. H28 year, cell culture, immunostaining and other conditions to discuss progress, overseas study opportunities to obtain, the study was interrupted After studying abroad, we will learn from each other and develop our research content.