ラマン散乱光解析を用いた悪性リンパ腫と加齢性変化の鑑別

使用拉曼散射光分析区分恶性淋巴瘤和年龄相关变化

• 批准号: 19K18873
• 负责人: 岩崎 優子
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K18873/
• 关键词: 悪性リンパ腫; ラマン散乱光; 加齢性変化

２０２１年度は留学による研究中断のため、２０２１年４月１日より、中断した４月２０日までの研究について実績を記載する。２０２０年度に作成したin vitroドルーゼンモデルにおける、ApoEの発現の、定量的な評価を行った。具体的には、トランスウェル上に３か月培養した網膜色素上皮を１０ウェル使用した。なお、この１０ウェルは同時に培養を開始し維持した。５ウェルにヒト血清を１週間添加し、残り５ウェルには添加せずにSerum Freeのまま維持した。同日に１０ウェルを４%PFAにて固定し、ApoE抗体およびアレクサ４８８二次抗体を用いて免疫細胞染色を施行した。なお、血清添加群、非添加群ともに、１ウェルのみ一次抗体を用いないネガティブコントロールをおいた。BZ-x700にて20倍の対物レンズを用いて抗体の発現範囲を評価すべく撮影した。撮影においては、撮影部位は画一的に、ウェルの中心において３×３のタイリングモードを使用した。撮影された写真は、画像解析ソフトFijiにて解析を行った。免疫染色陽性であった部位が画像全体に占める割合を評価した。一次抗体を用いないネガティブコントロールにおいては、血清の添加・非添加に関わらず、陽性の面積は０．００１％であった。ヒト血清を添加しない４ウェルでは平均０．０９％（標準偏差０．０５）で免疫染色が陽性であった。これに対し、ヒト血清を添加した４ウェルでは平均０．７９％（標準偏差０．４４）にて免疫染色が陽性となった。両群の平均値の差をt検定にて検定したところ、統計的に有意な差がみられた（p<0.05)。これにより、今回用いたin vitroのモデルでは、ドルーゼンの構成成分であるApoEの発現が亢進していることが定量的に確認された。

Research interruption in 2021, research interruption on April 1, 2021 In 2020, we will make a quantitative assessment of the development of ApoE in the future. The specific culture of retinal pigment epithelium is 10 months. 10 minutes later, he started to cultivate. 5. Serum Free and maintained within 1 week On the same day, 4% PFA was used to fix ApoE antibody and 488 secondary antibody. The serum is added, the serum is not added, and the primary antibody is used. The BZ-x700 is 20 times more sensitive to the presence of antibodies. The center of the image is the center of the image, and the center of the image is the center of the image. Photo and portrait analysis software Fiji analysis software Immunostaining positive parts of the picture accounted for all the cut and evaluation Primary antibody is used in addition to serum and non-addition, and the positive area is 0.001% The serum was added with an average of 0.09%(standard deviation 0.05) and immunostaining was positive. The serum was added with an average of 0.79%(standard deviation 0.44) and immunostaining was positive. The mean difference between the group values was statistically significant (p<0.05). This is the first time that ApoE has been identified in the composition of the vitro.