口腔がんに対する腫瘍免疫を惹起できる新しい腫瘍溶解アデノウイルスの開発

开发一种能够引发针对口腔癌的肿瘤免疫的新型溶瘤腺病毒

• 批准号: 19K19184
• 负责人: 鄭 朱蒙パトリック
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tottori University (2020)Hokkaido University (2019)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K19184/
• 关键词: 腫瘍溶解アデノウイルス; ARE-mRNA; GM-CSF

腫瘍溶解ウイルス療法とは、ウイルスの遺伝子を改変し、がん細胞に感染しがん細胞内で増殖することによって死滅させる治療方法の一種である。本研究ではアデノウイルスを改変した腫瘍溶解アデノウイルスにGM-CSF遺伝子を挿入し、腫瘍免疫を惹起できる新たな腫瘍溶解ウイルスの開発のための基礎検討をすることを目的としている。GM-CSFには免疫細胞の一種である樹状細胞を活性化する作用があることが知られており、申請者らはこれを腫瘍溶解ウイルスに組み合わせることでがん細胞を攻撃し、発現したGM-CSFによって活性化された樹状細胞がT細胞を活性化し、腫瘍免疫の獲得に至るのではないかと考えた。令和2年度は、申請者らが開発した腫瘍溶解アデノウイルスAd+AUと各種変異アデノウイルス、及びGM-CSFの併用効果について検討した。このウイルスはAU-rich element(ARE)を持つmRNAの核外輸送及び安定化を応用しており、ARE-mRNAが安定化しているがん細胞では増殖することが可能である。ヒト子宮頸がん細胞HeLa細胞・肺がん細胞A549・肝臓がん細胞HepG2に対し、Ad+AUとGM-CSFを併用し感染後の時間経過(1～14日)や濃度(0～100ng/mL)を検討した。その結果、同じウイルス力価でもGM-CSF濃度が高い系ではより効率的に細胞死を起こすことが明らかになった。また、Ad+AUは申請者らが挿入を予定している部位に変異を持つウイルスと比較した場合、同じウイルス量・同じGM-CSF添加量でより効率的に細胞死を引き起こすことが明らかとなった。これらは各種がん細胞においてAd+AUが各種変異アデノウイルスよりもより効率的に感染し増殖することを示しており、さらにGM-CSF濃度依存的にその効果は高まることを示唆する結果である。

溶瘤病毒疗法是一种治疗方法，其中改变了病毒以感染癌细胞并通过在癌细胞中增殖而杀死它们。这项研究旨在为开发新的溶瘤病毒的发展进行基本研究，这些病毒可以通过将GM-CSF基因插入已通过腺病毒修饰的溶瘤腺病毒中诱导肿瘤免疫。众所周知，GM-CSF具有激活树突状细胞（一种免疫细胞）的作用，并且申请人认为将其与溶瘤病毒相结合可以攻击癌细胞，并且由表达的GM-CSF激活的树突状细胞可以激活T细胞，从而导致肿瘤免疫获得。在2020财年，我们研究了由申请人开发的溶瘤腺病毒AD+AU，各种突变腺病毒和GM-CSF的综合作用。该病毒应用了携带Au富元件的mRNA（AS）的核输出和稳定，并且能够在稳定IS-MRNA的癌细胞中增殖。 AD+AU和GM-CSF与人宫颈癌细胞，肺癌细胞A549和肝癌细胞HEPG2结合使用，以确定时间过程（1-14天）和浓度（0-100 ng/ml）。结果表明，即使使用相同的病毒滴度，细胞死亡也会在GM-CSF浓度较高的系统中更有效地发生。还发现，与申请人计划插入的现场的病毒相比，病毒量和添加相同数量的GM-CSF的数量可能会更有效地导致细胞死亡。这些结果表明，多种癌细胞中的AD+AU比在各种突变腺病毒中更有效地感染和增殖，并且其作用以GM-CSF浓度依赖性方式增加。