口腔がんに対する腫瘍免疫を惹起できる新しい腫瘍溶解アデノウイルスの開発

开发一种能够引发针对口腔癌的肿瘤免疫的新型溶瘤腺病毒

• 批准号: 19K19184
• 负责人: 鄭 朱蒙パトリック
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tottori University (2020)Hokkaido University (2019)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K19184/
• 关键词: 腫瘍溶解アデノウイルス; ARE-mRNA; GM-CSF

腫瘍溶解ウイルス療法とは、ウイルスの遺伝子を改変し、がん細胞に感染しがん細胞内で増殖することによって死滅させる治療方法の一種である。本研究ではアデノウイルスを改変した腫瘍溶解アデノウイルスにGM-CSF遺伝子を挿入し、腫瘍免疫を惹起できる新たな腫瘍溶解ウイルスの開発のための基礎検討をすることを目的としている。GM-CSFには免疫細胞の一種である樹状細胞を活性化する作用があることが知られており、申請者らはこれを腫瘍溶解ウイルスに組み合わせることでがん細胞を攻撃し、発現したGM-CSFによって活性化された樹状細胞がT細胞を活性化し、腫瘍免疫の獲得に至るのではないかと考えた。令和2年度は、申請者らが開発した腫瘍溶解アデノウイルスAd+AUと各種変異アデノウイルス、及びGM-CSFの併用効果について検討した。このウイルスはAU-rich element(ARE)を持つmRNAの核外輸送及び安定化を応用しており、ARE-mRNAが安定化しているがん細胞では増殖することが可能である。ヒト子宮頸がん細胞HeLa細胞・肺がん細胞A549・肝臓がん細胞HepG2に対し、Ad+AUとGM-CSFを併用し感染後の時間経過(1～14日)や濃度(0～100ng/mL)を検討した。その結果、同じウイルス力価でもGM-CSF濃度が高い系ではより効率的に細胞死を起こすことが明らかになった。また、Ad+AUは申請者らが挿入を予定している部位に変異を持つウイルスと比較した場合、同じウイルス量・同じGM-CSF添加量でより効率的に細胞死を引き起こすことが明らかとなった。これらは各種がん細胞においてAd+AUが各種変異アデノウイルスよりもより効率的に感染し増殖することを示しており、さらにGM-CSF濃度依存的にその効果は高まることを示唆する結果である。

A method of treatment for tumor lysis therapy, cell infection, intracellular proliferation, and gene modification. The purpose of this study is to provide a basic discussion on the development of a new tumor lysis device that can improve tumor lysis, introduce GM-CSF gene into tumor lysis devices, and stimulate tumor immunity. GM-CSF activates dendritic cells as a type of immune cell, and the applicant dissolves the cells. GM-CSF activates dendritic cells and T cells. In 2002, the applicant was invited to open a study on the application of GM-CSF in combination with other drugs. The AU-rich element(ARE) can be used to stabilize and transport mRNA outside the nucleus. The time after infection (1~14 days) and the concentration (0~100ng/mL) of Ad+AU and GM-CSF in cervical HeLa cells, lung A549 cells and liver HepG2 cells were investigated. As a result, the concentration of GM-CSF was higher than that of GM-CSF. Ad+AU applicants are not allowed to enter a given site, but are allowed to compare the same amount of GM-CSF and the same rate of cell death. The results showed that there was no difference in the infection rate between Ad+AU and GM-CSF concentration.