分泌性病原因子を用いた新規魚類寄生虫ワクチンの開発

スクーチカ症は海産繊毛虫Miamiensis avidusを病原体とする魚類寄生虫病の一つで、養殖魚や水族館で飼育されている観賞魚に甚大な被害を及ぼしている。有力な感染症対策としてワクチンがあるが、魚類の寄生虫病に対するワクチンは一つも商品化されていない。その理由として、多くの寄生虫には生活史が存在し、抗原性が変化すること、培養が困難であること、ゲノム情報が少なく組換えワクチンの開発が困難であることが挙げられる。これまでに申請者らは、本虫の細胞外プロテアーゼ（ECPs）が細胞を溶解することを見いだし、病原性因子の一つであることを明らかにした。このことから、分泌性の病原性因子を抗原としたワクチンが開発できるのではないかという着想に至った。本課題ではゲノム編集技術を応用し、病原性因子であるプロテアーゼ遺伝子を特定し、それを用いた世界初の魚類寄生虫のワクチンを開発することを目的としている。これまでに、ゲノム編集実験に必要なプロモーターが見つからなかったため、昨年度も引き続き探索を行った。ハウスキーピング遺伝子として知られるグリセルアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼ遺伝子のプロモーター（M. avidus由来）および金属で誘導可能なメタロチオネインのプロモーター（テトラヒメナ由来）を導入したものの、下流のGFPの発現には至らなかった。

スクーチカ症は海産繊毛虫Miamiensis avidusを病原体とする魚類寄生虫病の一つで、養殖魚や水族館で飼育されている観賞魚に甚大な被害を及ぼしている。有力な感染症対策としてワクチンがあるが、魚類の寄生虫病に対するワクチンは一つも商品化されていない。その理由として、多くの寄生虫には生活史が存在し、抗原性が変化すること、培養が困難であること、ゲノム情報が少なく組換えワクチンの開発が困難であることが挙げられる。これまでに申請者らは、本虫の細胞外プロテアーゼ（ECPs）が細胞を溶解することを見いだし、病原性因子の一つであることを明らかにした。このことから、分泌性の病原性因子を抗原としたワクチンが開発できるのではないかという着想に至った。本課題ではゲノム編集技術を応用し、病原性因子であるプロテアーゼ遺伝子を特定し、それを用いた世界初の魚類寄生虫のワクチンを開発することを目的としている。これまでに、ゲノム編集実験に必要なプロモーターが見つからなかったため、昨年度も引き続き探索を行った。ハウスキーピング遺伝子として知られるグリセルアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼ遺伝子のプロモーター（M. avidus由来）および金属で誘導可能なメタロチオネインのプロモーター（テトラヒメナ由来）を導入したものの、下流のGFPの発現には至らなかった。